邵氏“五针法”对哮喘模型大鼠T-bet、GATA-3蛋白表达影响的实验研究

摘要

目的：
　　通过针刺哮喘模型大鼠“肺俞”、“大椎”、“风门”穴，观察针刺对哮喘模型大鼠肺组织和血清中转录因子 T-bet、GATA-3蛋白的表达及肺组织 HE染色病理变化的影响，探讨针灸治疗哮喘的机理，为针灸治疗哮喘机制提供科学的理论依据。
　　方法：
　　选用健康雄性清洁级SD大鼠40只，随机分成空白对照组、模型对照组、药物治疗组、针刺治疗组，每组10只。采用腹腔注射卵蛋白（OVA）和氢氧化铝干粉配置成的10％的复合 OVA抗原液致敏，并用1%的OVA溶液雾化吸入激发建立大鼠哮喘模型。针刺治疗组采用针刺“肺俞”(双)、“大椎”、“风门”(双)治疗，药物治疗组采用腹腔注射地塞米松治疗，模型对照组不做特殊处理，空白对照组用生理盐水代替卵蛋白，不予造模。治疗结束后，采用酶联免疫吸附法测定血清中转录因子 T-bet、GATA-3蛋白表达，免疫组化法测定肺组织中转录因子T-bet、GATA-3蛋白表达，HE染色法观察肺组织病理改变情况。
　　结果：
　　1.各组大鼠行为体征观察
　　模型对照组大鼠与空白对照组比较，出现喷嚏、呛咳、呼吸急促、精神不振、反应迟钝；而空白对照组大鼠未见异常；针刺治疗组、药物治疗组哮喘模型大鼠喷嚏、呛咳、喘息等症状较模型对照组明显减轻，反应灵敏。
　　2.各组大鼠肺组织形态学比较
　　模型对照组大鼠肺组织气道上皮脱落、黏膜增厚、大量炎性细胞浸润，肺泡间隔增宽，肺泡壁破裂甚至融合扩大；药物治疗组、针刺治疗组支气管结构基本完整，肺组织炎症浸润细胞较少，肺泡结构基本正常；空白对照组大鼠支气管肺组织结构完整，无明显脱落和皱褶，未见炎症细胞浸润，肺泡、肺泡间隔形态结构正常。
　　3.各组大鼠肺组织中T-bet蛋白表达的比较
　　模型对照组与空白对照组比较，模型对照组大鼠肺组织中转录因子T-bet阳性表达明显降低，差异具有统计学意义（P<0.01）；药物治疗组、针刺治疗组与模型对照组比较，T-bet阳性表达升高，差异具有统计学意义（P<0.01），仍低于空白对照组；针刺治疗组与药物治疗组比较，差异具有统计学意义（P<0.01）。
　　4.各组大鼠肺组织中GATA-3蛋白表达的比较
　　模型对照组与空白对照组比较，模型对照组大鼠肺组织中转录因子GATA-3阳性表达明显增高，差异具有统计学意义（P<0.01）；药物治疗组、针刺治疗组与模型对照组比较，GATA-3阳性表达降低，差异具有统计学意义（P<0.01），仍高于空白对照组；针刺治疗组与药物治疗组比较，差异具有统计学意义(P<0.01)。
　　5.各组大鼠血清中T-bet蛋白表达的比较
　　模型对照组与空白对照组比较，大鼠血清中T-bet蛋白表达显著降低，差异具有统计学意义(P＜0.01)；针刺治疗组及药物治疗组与模型对照组比较，T-bet蛋白表达明显升高，差异具有统计学意义(P＜0.01)，但仍低于空白对照组；针刺治疗组与药物治疗组比较，差异具有统计学意义(P＜0.01)。
　　6.各组大鼠血清中T-bet蛋白表达的比较
　　模型对照组与空白对照组比较，大鼠血清中GATA-3蛋白表达显著增高，差异具有统计学意义(P＜0.01)；针刺治疗组及药物治疗组与模型对照组比较，GATA-3蛋白表达明显降低，差异具有统计学意义(P＜0.01)，但仍高于空白对照组；针刺治疗组与药物治疗组比较，差异具有统计学意义(P＜0.01)。
　　结论：
　　1.邵氏“五针法”能明显改善哮喘模型大鼠的症状体征。
　　2.邵氏“五针法”可使哮喘模型大鼠肺组织局部的炎性细胞减少，抑制炎性介质的释放，修复损伤的支气管黏膜上皮，从而改善气道炎症，这可能是邵氏“五针法”防治哮喘的作用机制之一。
　　3.邵氏“五针法”能使哮喘模型大鼠肺组织中T-bet蛋白表达明显升高，G ATA-3蛋白表达明显降低。
　　4.邵氏“五针法”能使哮喘模型大鼠血清中T-bet蛋白表达明显升高，GATA-3蛋白表达明显降低。
　　本研究表明邵氏“五针法”可能通过提高肺组织及血清中T-bet含量，降低肺组织及血清中G ATA-3蛋白表达，从而修复损伤的支气管黏膜上皮，减轻炎性细胞的浸润，抑制气道炎症，控制哮喘发作，为针灸治疗哮喘提供了科学的理论依据。

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中文摘要

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前言

材料与方法

1实验材料

2实验方法

3统计学处理

实验结果

1实验期间各组大鼠行为体征观察

2各组大鼠肺组织HE染色形态学比较

3各组大鼠肺组织中T-bet蛋白表达的比较

4各组大鼠肺组织中GATA-3蛋白表达的比较

5各组大鼠血清中T-bet蛋白表达的比较

6各组大鼠血清中GATA-3蛋白表达的比较

理论探讨

1中医对哮喘的认识

2西医学对哮喘的认识

3对哮喘治疗方法的认识

4 针灸治疗哮喘的理论依据

5 存在的问题及展望

结论

致谢

参考文献

附录

附录1：病理图片

附录2：文献综述:针灸治疗支气管哮喘近十年研究进展

附录3： 在校期间论文著作及科研情况