雾化吸入母牛分枝杆菌预防小鼠支气管哮喘的效果观察

摘要

目的:
　　探讨雾化吸入母牛分枝杆菌对小鼠支气管哮喘的预防作用及相关机制。
　　方法:
　　40只雌性BALB/C小鼠按随机数字表法分为5组，每组8只，（22.5ug预防组（A组）、45.0ug预防组（B组）、67.5ug预防组（C组）、正常对照组（D组）和哮喘模型组（E组））。用鸡卵清蛋白(ovalbumin，OVA)腹腔注射致敏和雾化吸入激发制作小鼠支气管哮喘模型，每只小鼠每周腹腔注射1次OVA混合试剂致敏，连续3周，第4周开始予OVA·PBS液雾吸激发，每次30分钟，隔日1次，连续5次。预防组（A、B、C组）在哮喘模型制作前2周连续5天雾化吸入母牛分枝杆菌混合液10ml，每天1次。所有小鼠在模型制作后24小时内予无创肺功能仪检测小鼠气道反应性，随后处死小鼠，收集标本。病理HE染色、AB-PAS染色观察肺脏炎症情况，并进行半定量分析;液相芯片法检测血清及肺泡灌洗液中IL-4、IL-5、IL-17A、IFN-γ表达水平;免疫组织化学染色法检测肺IL-4、IL-5、IL-17A、IFN-γ及γδ-TCR表达水平。
　　结果:
　　与哮喘模型组比较，母牛分枝杆菌雾化吸入预防组小鼠气道反应性降低，肺组织炎症减轻，肺IL-4、IL-5、IL-17A、γδ-TCR表达水平降低(P值均＜0.05)，IFN-γ表达水平升高(P＜0.05)，三个预防组中以67.5ug预防组效果最明显(P＜0.05)。各预防组免疫组化结果:IL-4、IL-5、γδ-TCR表达水平，67.5ug预防组明显低于22.5ug、45.0ug预防组（P值均＜0.05）;IL-17A表达水平呈量-效负相关，差异有统计学意义(P＜0.05);IFN-γ表达水平67.5ug预防组明显高于22.5ug、45ug预防组(P＜0.05)。
　　结论:
　　雾化吸入母牛分枝杆菌可以明显降低支气管哮喘小鼠气道反应性，减轻气道炎症，用于支气管哮喘的预防，其机制可能与其减少支气管哮喘小鼠肺部γδ-T细胞聚集，纠正Th1/Th2失衡，抑制Th17型优势应答有关，其作用呈量-效负相关。

目录

声明

个人简历

摘要

前言

1．实验流程

2．实验材料

3．实验方法

2．气道反应性测定结果

3．肺组织病理学检查及半定量分析

4．液相芯片结果

5．免疫组化结果分析

讨论

结论

参考文献

综述 支气管哮喘治疗研究新进展

主要英文缩略词表

致谢