Ghrelin、IL--1β和TNF--α在膝骨关节炎不同Mankin病理分级软骨及滑膜中的表达及其意义

摘要

骨关节炎(ost eoart hritis，OA)是一种常见于中老年人的慢性关节疾病，病理改变主要为关节软骨退变、滑膜炎性增生和骨赘形成等，可由多种因素引起。负重的膝、髋关节最易受累。随着我国老龄化社会的来临，OA的发病率逐年上升，OA的治疗正成为今后医学的重大挑战。随着对OA研究的不断深入，人们逐渐认识到了Ghrelin、IL-1β和TNF-α等细胞因子在骨关节炎的发生、发展中起着十分重要的作用。本研究拟采用免疫组化方法检测Ghrelin、IL-1β和TNF-α在膝骨关节炎不同Mankin病理分级软骨、滑膜中的表达，探讨Ghrelin、IL-1β和TNF-α在KOA发展过程中的相关性，为临床治疗提供理论依据和可行指导方案。 第一部分 Ghrelin、IL-1β和TNF-α在膝骨关节炎不同Mankin病理分级退变软骨中的表达 目的：采用免疫组化方法检测Ghrelin、IL-1β和TNF-α在膝骨关节炎不同Mankin病理分级退变软骨中的表达，探讨Ghrelin、IL-1β和TNF-α在KOA发展过程中的相关性，为临床治疗提供理论依据和可行指导方案。 方法：选取34例不同退变程度膝骨关节炎软骨标本及6例下肢毁损伤或下肢血管栓塞截肢膝关节软骨标本，行HE染色和番红O染色，根据改良Mankin病理评分进行评分及分组：正常对照组6例、KOA轻度退变组7例、KOA中度退变组14例、KOA重度退变组13例。通过免疫组化方法检测各组软骨中Ghrelin、IL-1β和TNF-α的表达，采用IPP6.0图像分析软件进行半定量分析，用SPSS21.0软件对实验结果进行统计分析。 结果：(1)HE染色及番红O染色：各退变组与对照组之间相比较均有软骨细胞及细胞外基质程度不同的退变。(2)软骨免疫组化：1.Ghrelin平均光密度为：对照组0.006483±0.001169，轻度退变组0.004663±0.000532，中度退变组0.003498±0.000354，重度退变组0.001834±0.000590，各组间比较有显着性差异(P＜0.05)，Ghrelin的表达与改良Mankin病理评分Pearson相关系数r=-0.968。2.IL-1β平均光密度为：对照组0.000817±0.000352，轻度退变组0.002820±0.001464，中度退变组0.006117±0.001306，重度退变组0.008552±0.001221，组间比较有显着性差异(P＜0.05)，IL-1β的表达与改良Mankin病理评分Pearson相关系数r=0.996。3、TNF-α平均光密度为：对照组0.000817±0.000352，轻度退变组0.002668±0.001227，中度退变组0.006022±0.000959，重度退变组0.008735±0.001025，组间比较有显着性差异(P＜0.05)，TNF-α的表达与改良Mankin病理评分Pearson相关系数r=0.988。 结论：Ghrelin的表达与软骨退变呈负相关，IL-1β、TNF-α的表达与软骨退变呈正相关。 第二部分 Ghrelin、IL-1β和TNF-α在膝骨关节炎不同Mankin病理分级滑膜中的表达 目的：采用免疫组化方法检测Ghrelin、IL-1β和TNF-α在膝骨关节炎不同Mankin病理分级滑膜中的表达，探讨Ghrelin、IL-1β和TNF-α在KOA发展过程中的相关性，为临床治疗提供理论依据和可行指导方案。 方法：选取37例不同严重程度膝骨关节炎滑膜标本和7例正常膝关节滑膜标本，行常规HE染色，根据Mankin病理评分，对标本进行评分及分组：正常对照组7例、KOA轻度组7例、KOA中度组15例、KOA重度组15例。采用免疫组化法测定Ghrelin、IL-1β和TNF-α在各组滑膜中的表达，利用IPP6.0图像分析软件进行半定量分析，用SPSS21.0软件分析实验结果的相关性。 结果：(1)HE染色：KOA各滑膜组与正常对照组比较都有不同程度滑膜增生、水肿、纤维化及炎症细胞浸润。(2)免疫组化：1、滑膜Ghrelin平均光密度为：正常对照组0.008694±0.000711、轻度组0.006259±0.000579、中度组0.004399±0.000779、重度组0.001664±0.000495。组间差异有统计学意义(P＜0.05)，Ghrelin的表达与滑膜Mankin病理评分Pearson相关系数r=-0.982，呈负相关。2、滑膜IL-1β平均光密度为：正常对照组0.000630±0.000231、轻度组0.001914±0.000552、中度组0.003314±0.000526、重度组0.004792±0.000645。组间差异有统计学意义(P＜0.05)，IL-1β的表达与滑膜Mankin病理评分Pearson相关系数r=0.970，呈正相关。3、滑膜TNF-α平均光密度为：正常对照组0.001686±0.000203、轻度组0.002863±0.000509、中度组0.005242±0.001057、重度组0.008767±0.001019，组间差异有统计学意义(P＜0.05)，TNF-α的表达与滑膜Mankin病理评分Pearson相关系数r=0.973，呈正相关。 结论：Ghrelin的表达与滑膜炎呈负相关，IL-1β、TNF-α的表达与滑膜炎呈正相关。