糖蜜酒精废液诱导康氏木霉产纤维素酶的研究

摘要

糖蜜酒精废液是糖厂的主要污染源之一,是一种深褐色、高酸性、高浓度有机废水.广西大学食品与发酵工程所研究其综合治理时,发现糖蜜酒精废液有促进康氏木霉产纤维素酶的作用,该论文为此作了深入研究.论文研究了糖蜜酒精废液诱导下的纤维素酶酶学特性:FP,EG,BG,CBH酶的最适pH分别为4.8,4.8,4.8,5.0;最适作用温度分别为50℃,70℃,60℃,55℃;测定了CBH,EG,BG酶的米氏常数;探讨了底物浓度、稀释倍数、金属离子等因素对FP,EG,BG,CBH酶的影响.论文分离纯化了纤维素酶:EG,BG酶经DEAE C52,CL-6B柱层析分离,酶活力最终回收率分别为2.06％,65.11%,纯化倍数分别为24.55、169.84,比活力分别达189.48IU/mg蛋白,656.28IU/mg蛋白.CBH酶经DEAE-C52分离,回收率和纯化倍数分别为85.61%,31.56.论文研究分析了糖蜜酒精废液的诱导机理:表明糖蜜酒精废液对纤维素酶的产生具有诱导效应,而非营养因素的作用;其FP酶活力是Mandels营养液的4.8倍;EG,BG,CBH酶活力是Mandels营养液的3~5倍.经电泳测定,糖蜜酒精废液诱导康氏木霉大量表达胞外蛋白P<'17.8>,p<'72.9>;胞外蛋白P<'17.8>,p<'72.9>不具有EG,BG,CBH酶活性,即无纤维素酶活性.

目录

文摘

英文文摘

第一章 综 述

1.1糖蜜酒精废液的来源及综合治理

1.2纤维素酶酶系的作用方式

1.3纤维素酶的研究进展

1.4纤维素酶的应用

1.5本课题研究的意义和主要内容

第二章 糖蜜酒精废液影响下的纤维素酶酶学特性的研究

2.1pH值对纤维素酶的影响

2.2温度对酶活力的影响

2.3底物浓度对纤维素酶活的影响

2.4金属盐离子对纤维素酶活的影响

2.5稀释倍数对纤维素酶活的影响

2.6糖蜜酒精废液固态发酵的纤维素酶米氏常数的测定

2.7 小结

第三章 糖蜜酒精废液对纤维素酶的诱导及其机理

3.1糖蜜酒精废液对康氏木霉产纤维素酶的影晌

3.2康氏木霉生长动力学及产酶动力学特性研究

3.3纤维素酶的硫酸铵分级沉淀

3.4纤维素酶的离子交换柱DEAE cellulose 52层析

3.5纤维素酶的DEAE sephrose CL-6B柱层析

3.6糖蜜酒精废液诱导康氏木霉分泌纤维素酶的机理

3.7 小结

第四章 总结与展望

4.1总结

4.2展望

参考文献

附录1 DNS测定还原糖法标准曲线的制作

附录2氧化酶法测定葡萄糖标准曲线

附录3 P-NPG法测定葡萄糖标准曲线方程

附录4纤维素酶活力的测定

附录5 Braford检测法测定蛋白质浓度

附录6实验中主要仪器

致谢