东方百合离体培养与试管鳞茎诱导的研究

摘要

本论文报道了对东方百合进行离体培养的研究结果，包括鳞片外植体的选择与灭菌、鳞茎芽的诱导分化、鳞茎芽的继代培养和增殖、试管鳞茎的诱导、试管苗的生根与移栽等，以建立较完善的东方百合组织培养技术体系。主要结果如下： 1、东方百合外层、中层鳞片较适宜的灭菌处理为：10％NaClO 10min+0.1％HgCl2 25min；内层鳞片较适宜的灭菌处理为：10％NaClO 10min+0.1％HgCl2 10min。 2、东方百合适宜的鳞片诱导分化培养基为：MS+6-BA 1.0mg/L+2，4-D 0.5mg/L+NAA 0.2mg/L。不同品种鳞片的芽诱导分化能力不同：索邦鳞茎芽诱导率71.45％，平均生成鳞茎芽数3.95；元帅鳞茎芽诱导率66.06％，平均生成鳞茎芽数3.48；西伯利亚鳞茎芽诱导率56.67％，平均生成鳞茎芽数2.09。同一品种不同部位的鳞片诱导能力也有差异，内层低于外层和中层。 3、三种基本培养基对东方百合鳞茎芽的增殖效应：MS>Miller>White。在这三类培养基中，索邦品种芽增殖倍数依次为：4.69、1.83、1.23；西伯利亚品种芽增殖倍数依次为：3.70、1.67、0.83；元帅品种芽增殖倍数依次为3.86、1.85、1.11。 4、一定浓度范围内的6-BA、KT和NAA、IBA间的配组对东方百合鳞茎芽的增殖起促进作用。鳞茎组培芽增殖的适宜培养基为：MS+1.0-2.0mg/L6-BA+1.0mg/LKT+0.2mg/LNAA，不同品种对最佳激素组合浓度略有不同。3个品种间的芽增殖结果比较，以索邦最优。 5、不同细胞分裂素种类对芽增殖和壮苗的效果不同。6-BA在芽增殖方面优于同浓度水平的KT；KT在壮苗方面优于同浓度水平的6-BA。 6、东方百合增殖培养的适宜代数是3～5代。芽增殖倍数比较：索邦>元帅>西伯利亚。 7、适当提高蔗糖浓度能促进东方百合三个品种试管结鳞茎。当蔗糖浓度为80g/L时，东方百合三个品种的结鳞茎率、鳞茎直径和鳞茎鲜重均达到最大值。索邦结鳞茎率为100％，鳞茎直径1.768cm，鳞茎鲜重8.55g；西伯利亚结鳞茎率为100％，鳞茎直径．1.709cm，鳞茎鲜重8.01g；元帅结鳞茎率为100％，鳞茎直径1.744cm，鳞茎鲜重8.82g。但当蔗糖至高浓度(>100g/L)则对试管结鳞茎不利，所形成的鳞茎变小。 8、培养基中附加香豆素对试管结鳞茎有利。东方百合三个品种索邦、西伯利亚和元帅的香豆素适宜浓度分别为：12mg/L、6mg/L和9mg/L。 9、多效唑(MET)的适宜浓度对东方百合三个品种试管结鳞茎有促进作用。索邦的MET适宜浓度为3mg/L；西伯利亚和元帅的MET适宜浓度为2mg/L。 10、基本培养基1/2MS比MS更利于东方百合的生根。三个品种的苗素质和根素质比较：索邦>西伯利亚>元帅。 11、生长激素NAA、IBA浓度均以0.9mg/L时，适宜东方百合三个品种的生根培养。两种激素比较，NAA的生根效应优于IBA。 12、生根粉ABT有良好的发根作用。当ABT浓度为4.0mg/L时，索邦根数最多，为17.95条；当ABT浓度为3.0mg/L时，元帅根数最多，为13.45条；当ABT浓度为2.0mg/L时，西伯利亚根数最多，为12.67条。 13、适宜浓度(0.6-0.9mg/L)的多效唑能使苗健壮，苗移栽后成活率也较高。MET浓度过高(>1.2mg/L)会抑制试管苗的生长。 14、不同种类基质对试管苗移栽生长影响不同。单一基质比较：泥炭>菜园土>细沙>黄泥，索邦品种在泥炭中的成活率为98.91％，西伯利亚为84.62％，元帅为90.00％。复合基质效果优于单一基质，泥炭1/2+珍珠岩1/4+菜园土1/4是东方百合三个品种较为理想栽培基质。在此复合基质中，索邦品种成活率为100％，西伯利亚为90.00％，元帅为95.90％。品种间移栽成活率、抗逆性、适应力比较：索邦>元帅>西伯利亚。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：英文缩略词表

声明

1前言

1.1百合分类学研究

1.2百合资源的分布概况

1.3百合生物学特征

1.4百合栽培与繁殖方式的研究

1.5百合育种的研究

1.6百合组织培养的研究

1.6.1百合组织培养外植体的选择

1.6.2外植体的灭菌处理

1.6.3不同百合品种、不同部位、不同培养基及激素配比与诱导效应的研究

1.6.4试管内结鳞茎的研究

1.6.5试管苗移栽的研究

1.7试验的意义与目的

1.8本研究的创新点

2材料与方法

2.1试验材料

2.1.1鳞片诱导分化材料

2.1.2继代增殖材料

2.1.3试管内结鳞茎材料

2.1.4生根培养材料

2.1.5移栽试验材料

2.2试验方法

2.2.1鳞片灭菌处理

2.2.2鳞片鳞茎芽诱导分化方法

2.2.3鳞茎芽继代增殖方法

2.2.4试管结鳞茎方法

2.2.5生根培养方法

2.2.6移栽试验方法

2.2.7培养基和接种方式

2.2.8培养条件

2.2.9统计公式

2.2.10数据分析及统计

2.3试验设计

2.3.1东方百合鳞片的灭菌处理试验

2.3.2东方百合鳞茎芽的诱导分化试验

2.3.3东方百合鳞茎芽继代增殖试验

2.3.4东方百合试管苗结鳞茎试验

2.3.5东方百合试管苗生根壮苗试验

2.3.6东方百合试管苗移栽试验

3结果与分析

3.1不同灭菌处理对东方百合鳞片灭菌效果及诱导率的影响

3.1.1不同灭菌剂组合处理对东方百合鳞片灭菌效果及诱导率的影响

3.1.2不同灭菌时间对东方百合鳞片灭菌效果的影响

3.1.3灭菌处理对东方百合鳞片不同部位灭菌效果及诱导率的影响

3.2东方百合鳞茎芽诱导分化效果

3.2.1不同激素处理对东方百合鳞茎芽诱导分化效果的影响

3.2.2东方百合鳞片不同部位的鳞茎芽诱导分化效果

3.3东方百合鳞茎组培芽继代增殖试验结果

3.3.1不同基本培养基对东方百合鳞茎芽增殖的影响

3.3.2不同激素种类及浓度配组对东方百合鳞茎芽增殖的影响

3.3.3不同代数间鳞茎芽增殖的结果

3.4东方百合试管苗结鳞茎试验结果

3.4.1不同蔗糖浓度对东方百合试管苗结鳞茎的影响

3.4.2不同浓度香豆素对东方百合试管苗结鳞茎的影响

3.4.3不同浓度多效唑对东方百合试管苗结鳞茎的影响

3.5东方百合试管苗生根壮苗试验结果

3.5.1基本培养基MS和1/2MS对东方百合试管苗生根壮苗的影响

3.5.2生长激素NAA、IBA对东方百合试管苗生根的影响

3.5.3生根粉(ABT)对东方百合试管苗生根的影响

3.5.4多效唑(MET)对东方百合试管苗生根的影响

3.6东方百合试管苗移栽试验结果

3.6.1不同生根处理对东方百合试管苗移栽生长的影响

3.6.2不同基质对东方百合试管苗移栽生长的影响

4讨论与结论

4.1东方百合鳞片的选择及消毒灭菌

4.2东方百合鳞片的初代培养

4.3东方百合鳞茎芽的继代培养

4.4东方百合试管苗结鳞茎

4.5东方百合试管苗生根壮苗

4.6东方百合试管苗移栽

致谢

参考文献

附录