平菇木霉病的病原鉴定及其防治初步研究

摘要

木霉是平菇栽培的重要病原真菌，引起平菇产量减少和品质下降。本文从被木霉污染的食用菌栽培料中分离木霉并进行形态学和分子鉴定、最适生长温度测定以及致病力分析。在此基础上，以133个平菇菌株为材料，通过室内甲板试验和栽培试验来进行平菇对木霉的抗性分析，并探讨植物源农药和植物乙醇提取液对木霉和平菇的影响。所得主要结果如下：
　　 ⑴从被木霉污染的食用菌栽培料中分离纯化得到37株木霉，经形态学鉴定为哈茨木霉Trichoderma harzianum、平菇木霉Trichoderma pleurotum、长枝木霉Trichoderma longibrachiatum和橘绿木霉Trichoderma citrinoviride，其中以平菇木霉为主。对木霉菌株进行ITS序列分析和系统发育树构建，序列分析支持形态学鉴定结果。温度试验表明，4种木霉的最适生长温度为28～30℃。对37株木霉进行致病力测定，发现致病力强的菌株为哈茨木霉和平菇木霉。
　　 ⑵以哈茨木霉T12和平菇木霉T33为供试菌，从133个平菇菌株中筛选得到18个对木霉T12有一定抗性的菌株，并进行栽培试验，结果表明P131的抗霉力最强，总产量损失率最低，而且子实体形态特征良好。拮抗反应结果显示P131与其他供试菌株亲缘关系较远，而且在栽培中发现P131子实体不同于其余菌株，颜色较深，菌盖较小。
　　 ⑶药剂室内试验结果表明，5种植物源农药对木霉和平菇的长速均有较大的抑制作用，木霉菌丝变得稀疏细弱、孢子产量明显减少，而平菇菌丝比对照浓密和粗壮。其中，丁子香酚对哈茨木霉的抑制作用最大，对平菇菌丝抑制作用较小。
　　 ⑷植物提取液室内试验结果表明:丁香Syzygium aromaticum能完全抑制2种木霉菌丝的生长和孢子的萌发;厚朴Magnolia officinalis对哈茨木霉菌丝抑菌率为83.18％，对其孢子抑制率为100％，对平菇木霉菌丝和孢子的抑制率均为100％。总体看来，丁香和厚朴的乙醇提取液对木霉的抑制效果最好;厚朴对平菇菌丝抑制率为44.39％，平菇菌丝比对照组更浓密洁白。

目录

声明

摘要

1 前言

1．1 平菇综述

1．2 食用菌真菌病害

1．3 木霉综述

1．4 食用菌病害的防治

1．4．1 食用菌抗病菌株的筛选

1．4．2 食用菌病害的化学药剂防治

1．4．3 食用菌病害的生物防治

1．5 本研究的目的与意义

2 材料与方法

2．1 材料

2．1．1 寄主与病原菌

2．1．2 供试植物源农药

2．1．3 供试植物

2．1．4 供试培养基及主要试剂

2．1．5 主要仪器设备

2．2 方法

2．2．1 病原菌的分离与纯化

2．2．2 木霉的形态鉴定

2．2．3 木零的rDNA-ITS序列测定

2．2．4 木霉生长温度试验

2．2．5 木毒致病力的测定

2．2．6 平板对峙试验

2．2．7 木霉对平菇抑菌率的测定

2．2．8 平菇菌株间的拮抗试验

2．2．9 栽培试验

2．2．10 植物源农药对木霉菌丝和平菇菌丝抑制作用的测定

2．2．11 植物源农药对木霉孢子抑制作用的测定

2．2．12 植物有效成分的提取

2．2．13 植物提取液对木霉菌丝和平菇茵丝抑制作用的测定

2．2．14 植物提取液对木毒孢子抑制作用的测定

3 结果与分析

3．1 木霉的分离、鉴定及致病力测定

3．1．1 木霉分离结果

3．1．2 木毒的鉴定

3．1．3 木毒生长温度试验结果

3．1．4 木霉对平菇菌丝的致病力测定结果

3．2 平板对峙试验结果

3．3 木霉对平菇的抑菌率测定结果

3．4 平菇菌株间的拮抗试验

3．5 平菇栽培试验结果

3．5．1 平菇菌丝生长情况

3．5．2 不同平菇菌株菌丝的抗霉能力

3．5．3 平菇出菇情况

3．5．5 平菇产量比较结果

3．5．6 平菇子实体总产量损失情况比较

3．6 植物源农药对木霉和平菇的影响

3．6．1 植物源农药对木霉菌丝和平菇菌丝的影响

3．6．2 植物源农药对木霉孢子萌发的影响

3．7 植物提取液对木霉和平菇的影响

3．7．1 植物乙醇提取液对木霉菌丝和平菇菌丝的影响

3．7．2 植物乙醇提取液对木霉孢子萌发的影响

4 结论与讨论

4．1 结论

4．1．1 食用菌栽培上的主要木霉种类及其致病力

4．1．2 平菇对木毒的抗性分析

4．1．3 植物源农药对木霉及平菇的影响

4．1．4 植物乙醇提取液对木霉及平菇的影响

4．2 讨论

4．2．1 食用菌的木霉种类与致病力

4．2．2 形态鉴定与ITs序列鉴定

4．2．3 平菇菌株对木霉的抗性

4．2．4 植物源农药对木霉和平菇的影响

4．2．5 植物乙醇提取液对木毒和平菇的影响

5 问题与展望

致谢

参考文献

附录