南宁市郊平菇主要病害病原鉴定及生物防治

摘要

平菇是我国栽培最广泛的食用菌。近年来，平菇病害在南宁市发生严重，造成了巨大的经济损失，且严重阻碍了广西食用菌产业的发展。经过分离纯化得到病原菌，并对主要病原菌的生物学特性和对平菇的侵染能力进行研究;在此基础上，以分离得到的病原菌为供试菌株，探讨利用拮抗微生物及植物提取液防治食用菌病害的生物防治技术，取得的研究结果如下:
　　1、采集南宁市郊污染平菇菌袋45袋，分离纯化后得到病原菌52株;经形态学鉴定，共有5种病原菌，其中木霉31株，占分离比例的59.62％，分别为:哈茨木霉（Trichoderma harzianum）、平菇木霉（T.pleurotum）、侧耳木霉（T.pleuroticola）、长枝木霉（T.longibrachiatum）、绿木霉(T.virens);链孢霉(Neurospora)6株;其余病原菌共15株。对不同种的木霉进行分子生物学鉴定，其结果与形态学鉴定结果一致。选取4株南宁主要栽培的平菇菌种，测定5种木霉对平菇的侵染能力，其中哈茨木霉、平菇木霉、侧耳木霉、绿木霉对4株平菇有强侵染能力。
　　2、以分离得到的病原菌L3、L6、M11、M23、M15、M27和M21为供试菌株，研究温度和pH对其生长的影响。结果表明:菌株L3和L6的最适生长温度为35℃，最适pH5.0;菌株M11、M23、M15、M21的最适生长温度为30℃，菌株M27的最适生长温度为35℃，其最适pH范围均为5.0-6.0。
　　3、从平菇污染菌袋中共分离到细菌114株，经筛选得到3株对病原菌L3、L6、M11、M23、M15有明显拮抗作用而对供试4种平菇拮抗作用较小的细菌。测定3株拮抗细菌发酵液的抑菌作用，结果表明:3株拮抗细菌发酵液对菌株L3、L6、M11、M23、M15的菌丝生长、产孢量及孢子萌发均有较强的抑制作用;当拮抗细菌B44和B106发酵液浓度达到40％时，对供试的5种病原菌的抑制效果最好;当拮抗细菌B72发酵液浓度达到50％时，抑制效果最好。采用形态观察、生理生化反应及16S rDNA序列分析，菌株B44、B72、B106初步鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。
　　4、测定16种中草药水煎剂抑菌活性，结果表明:商陆对病原菌L3、L6、M11、M23、M15的抑菌活性最好，但其对平菇的毒害也较大。阔叶十大功劳对菌株M11、M23、M15的抑制作用较好，且其对平菇的毒害作用小;在浓度为100mg/mL时，对菌株M11、M23、M15的抑制率分别为:73.72％、94.66％、96.23％，对平菇平558和秀珍0811的抑制率分别为28.97％和20.83％，差异显著。

目录

声明

摘要

1 前言

1．1 食用菌概述

1．2 食用菌病害概述

1．2．1 食用菌菌丝体侵染性病害

1．2．2 食用菌菌丝体竞争性病害

1．2．3 侵染性病害与竞争性病害的异同

1．2．4．食用菌主要竞争性病害

1．3 木霉对食用菌菌丝体的致病机制

1．4 食用菌病害的防治

1．4．1 农业防治

1．4．2 化学防治

1．4．3 生物防治

1．5 研究目的与意义

2 材料与方法

2．1 材料

2．1．1 供试病原菌及平菇菌株

2．1．2 供试中草药

2．1．3 供试培养基

2．1．4 主要试剂及缓冲液

2．2 方法

2．2．1 平菇病害样品采集

2．2．2 病原菌的分离纯化

2．2．3 病原菌的鉴定

2．2．4 部分病原菌对平菇的侵染能力测定

2．2．5 病原菌部分生物学特性的测定

2．2．6 拮抗细菌的分离纯化

2．2．7 拮抗细菌的筛选

2．2．8 拮抗细菌发酵液的抑菌作用

2．2．9 拮抗细菌的鉴定

2．2．10 中草药水煎剂的制备

2．2．11 中草药水煎剂的抑菌活性测定

2．2．12 中草药水煎剂对菌株M11、M15、M23菌丝生长的毒力测定

2．2．13 数据处理

3 结果与分析

3．1 南宁市郊平菇病害发生情况

3．2 病原菌的鉴定及侵染能力的测定

3．2．1 病原菌的分离纯化

3．2．2 病原菌的形态鉴定

3．2．3 菌株M11、M23、M15、M27、M21的分子鉴定

3．2．4 菌株M11、M23、M15、M27、M21对平菇的侵染能力测定

3．2．5 病原菌L3和L6的鉴定

3．3 病原菌的部分生物学特性

3．3．1 温度对病原菌苗丝生长的影响

3．3．2 温度对病原菌产孢量的影响

3．3．3 病原菌致死温度的测定

3．3．1 pH值对病原菌菌丝生长的影响

3．4 拮抗细菌的筛选、抑菌作用研究及鉴定

3．4．1 细菌的分离结果

3．4．2 拮抗细菌的筛选

3．4．3 拮抗细菌发酵液的抑制作用

3．4．4 拮抗细菌的鉴定

3．5 中草药水煎剂的抑菌活性测定

3．5．1 中草药水煎剂对菌株L3、L6的抑菌活性测定

3．5．2 中草药水煎剂对菌株M11、M23、M15抑菌活性的测定

3．5．3 中草药水煎剂对平菇抑营活性的测定

3．5．4 阀叶十大功劳对菌株M11、M23、M15的毒力测定

4 结论与讨论

4．1 南宁市郊平菇病害的发生

4．2 病原菌的分离、鉴定

4．3 木霉侵染能力的测定

4．4 病原菌的部分生物学特性

4．5 拮抗细菌的筛选

4．6 拮抗细菌发酵液的抑制作用

4．7 拮抗细菌的鉴定

4．8 中草药水煎剂对病原菌抑菌活性的研究

致谢

参考文献

附录

作者在攻读硕士学位期间论文发表情况