铜绿假单胞菌GF31及其胞外粗酶液对高效氯氰菊酯的降解研究

摘要

高效氯氰菊酯是一种人工合成的广谱拟除虫菊酯类杀虫剂,由于其对害虫具有强烈的神经毒性,在世界范围内被广泛应用于农业与家庭内等处的害虫防治,长期使用造成的残留破坏生态环境,也危害人类的健康。利用微生物降解或矿化是一种安全有效的环境修复手段。
　　本文首先根据降解体系特性,建立了乙腈-无机盐-水双水相萃取高效氯氰菊酯及其降解产物3-苯氧基苯甲醛和3-苯氧基苯甲酸的方法,平均回收率在94.8％~98.3%之间,变异系数在2.1～3.2之间。与文献报道方法相比,该方法较为简单,能够精确定量测定水样中高效氯氰菊酯、3-苯氧基苯甲酸和3-苯氧基苯甲醛和残留。
　　研究实验室分离保藏的一株铜绿假单胞菌GF31的菌体降解特性,发现它不能以高效氯氰菊酯为唯一碳氮源生长;认为在无外加营养条件下具有降解效果是因为细胞释放胞外酶而发生的降解作用。发现此降解酶的生成不需要诱导,是组成酶。产酶条件初步优化,但是没有找出影响显著的因素。
　　研究外加营养源对铜绿假单胞菌GF31降解高效氯氰菊酯的影响,可知向无机盐培养基中添加不同种类的碳氮源与不同C/N的营养源时,均对高效氯氰菊酯的降解率造成影响。当添加甘露醇和硫酸铵C/N为3:1(N浓度为1g?L-1)时,降解率有最高值,为46.4%;营养源过量添加,会导致细菌代谢产生的物质较多,直接使体系的pH下降,导致降解率较低。降解率高低与菌量的多少没有正相关关系。通过高效液相色谱对产物的检测,发现铜绿假单胞菌GF31可以把高效氯氰菊酯降解为3-苯氧基苯甲醛(3-pbh),再迅速将3-苯氧基苯甲醛(3-pbh)转化为3-苯氧基苯甲酸(3-pba)。

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第一章 绪论

1.1 拟除虫菊酯类农药的特性与危害

1.2 拟除虫菊酯类农药检测前处理技术

1.3 拟除虫菊酯类农药降解菌的分离与鉴定

1.4拟除虫菊酯类农药降解酶的研究

1.6 拟除虫菊酯类农药降解机理与代谢产物的研究

1.7 外加营养源对微生物降解拟除虫菊酯影响的研究

1.8 本课题研究内容及研究意义

第二章 样品的制备及其分析

2.1 实验材料及设备

2.2 实验方法

2.3 实验结果与讨论

2.4 本章小结

第三章 铜绿假单胞菌GF31的降解特性、产物及产酶条件优化

3.1 实验材料及设备

3.2 实验方法

3.3 实验结果与讨论

3.4 本章小结

第四章 外加营养源对铜绿假单胞菌GF31降解高效氯氰菊酯的影响

4.1 实验材料与设备

4.2实验方法

4.3实验结果与讨论

4.4 本章小结

第五章 结论与展望

参考文献

附录

致谢

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