对虾中副溶血性弧菌预测模型的建立及定量风险评估研究

摘要

副溶血性弧菌是一种革兰氏阴性、嗜盐的食源性致病菌，会使人产生水性腹泻、腹部绞痛、呕吐等症状，严重的会导致死亡。人类感染通常与食用未充分煮熟的或生食水产品有关。中国是全球最大的对虾生产国，对虾产业占广西水产业近90％。广西人民素爱生食水产品如鱼生、虾生等。而对虾中副溶血性弧菌阳性率较高，因此需要开展对虾中副溶血性弧菌的风险评估。
　　本论文建立对虾中副溶血性弧菌的生长和失活模型，研究南宁市对虾中副溶血性弧菌的污染状况及耐药性，利用这些数据并结合居民消费对虾情况，基于微生物定量风险评估框架，以购买对虾为起点，最终食用为终点，初步建立对虾中副溶血性弧菌的定量风险评估，评估广西居民每人每年消费对虾患病的风险。具体研究结果如下:
　　1.副溶血性弧菌的最适pH值为7～9，最适生长盐度为2％～4％，最适生长温度为30℃～40℃。
　　生长模型研究中，采用修正Gompertz、修正Logistic、Richards和Baranyi模型拟合副溶血性弧菌的生长曲线，并用均方根误差（RMSE），偏差因子(Bf)和准确因子(Af)验证模型，结果显示修正Gompertz模型的拟合效果最好。以平方根模型和Davey模型为二级模型，分别对修正Gompertz模型的生长速率和延滞期进行拟合，并采用Bf和Af来验证模型的可靠性。结果表明平方根模型和Davey模型能分别有效的预测副溶血性弧菌的生长速率和延滞期随温度变化的情况。
　　失活模型研究中，采用Weibull模型、Linear模型和Logistic模型拟合副溶血性弧菌的失活曲线，结果显示冷藏条件(5℃)下Weibull模型拟合效果较高;而Logistic模型能够较好的描述冷冻条件(-18℃)下副溶血性弧菌失活率的变化特征。
　　2.污染状况调查结果显示，采集鲜活市售对虾91份，检测出副溶血性弧菌的样品数为50份，总检出率为54.9％，样品中副溶血性弧菌的几何平均浓度为135.3 MPN/g。经非参数检验，不同采样地点副溶血性弧菌的检出浓度有显著性差异(P＜0.05)，但其检出率无显著性差异(P＞0.05);不同采样季节检出浓度有显著性差异(P＜0.05)，但其检出率均无显著性差异(P＞0.05)。
　　耐药性结果显示，副溶血性弧菌对阿莫西林、氨苄西林等青霉素类抗菌药物高度耐药(＞94％);对氨基糖苷类、四环素类、喹诺酮类等有部分菌株耐药;对头孢类、氯霉素类、磺胺类等抗菌药物敏感。副溶血性弧菌对抗生素的耐药比较普遍，并且出现了2株耐4种药物的耐药株，应加大对虾养殖过程用药的监管。
　　3.利用预测模型及监测到的数据，基于微生物定量风险评估框架，评估广西南宁市居民每人每年食用被副溶血性弧菌污染的对虾患病的概率为2.432×10-5，南宁市居民每年因食用被副溶血性弧菌污染的对虾患病的人数为176人。
　　各主要因素的敏感性按相关系数从大到小排序为:对虾中副溶血性弧菌的污染浓度分布＞零售点到家庭的温度＞对虾生食比例＞零售点到家庭的时间＞家庭常温放置至食用前的时间。因此有效降低对虾中副溶血性弧菌的污染浓度，控制对虾运输过程的温度(＜10℃)，减少对虾生食比例是控制风险的关键。

目录

声明

摘要

第一章 绪论

1．1 引言

1．2 副溶血性弧菌

1．2．1 生物特性

1．2．2 副溶血性弧菌的流行病学

1．2．3 副溶血性弧菌的耐药情况

1．3 预测微生物学

1．3．1 定义

1．3．2 模型类型

1．3．3 副溶血性弧菌预测模型研究进展

1．4 微生物风险评估

1．4．1 风险分析

1．4．2 风险评估

1．4．3 副溶血性弧菌风险评估研究进展

1．5 研究目的与意义

1．5．1 研究意义

1．5．2 研究目的

1．5．3 研究内容

第二章 副溶血性弧菌的生长和失活模型的建立

2．1 引言

2．2 材料与设备

2．2．1 实验菌株

2．2．2 仪器设备

2．2．3 实验试剂和培养基

2．3 方法

2．3．1 副溶血性弧菌OD600值与菌液浓度之间的关系

2．3．2 无菌对虾的制备

2．3．3 副溶血性弧菌的生长情况

2．3．4 副溶血性弧菌生长模型的建立

2．3．5 副溶血性弧菌失活模型的建立

2．3．6 数据统计分析

2．4 结果与讨论

2．4．1 副溶血性弧菌OD600值与菌液浓度之间的关系

2．4．2 副溶血性弧菌的生长情况

2．4．3 副溶血性弧菌生长模型的建立

2．4．4 副溶血性弧菌失活模型的建立

2．5 本章小结

第三章 南宁市对虾中副溶血性弧菌的污染状况及对虾消费情况调查

3．1 引言

3．2 实验材料

3．2．1 材料

3．2．2 仪器设备

3．2．3 培养基和实验试剂

3．3 方法

3．3．1 广西南宁市居民对虾消费情况调查

3．3．2 对虾中副溶血弧菌的检验方法

3．3．3 耐药性试验

3．3．4 数据处理与统计分析

3．4 结果与讨论

3．4．1 居民对虾消费情况调查

3．4．2 不同季节对虾中副溶血性弧菌的检出情况

3．4．3 不同采样地点对虾中副溶血性弧菌的检出情况

3．4．4 药敏试验结果

3．5 本章小结

第四章 对虾中副溶血性弧茵的定量风险评估研究

4．1 引言

4．2 材料与方法

4．2．1 风险评估框架

4．2．2 数据和资料来源

4．3 结果与讨论

4．3．1 危害识别

4．3．2 危害特征描述

4．3．3 暴露评估

4．3．4 风险特征描述

4．4 本章小结

第五章 结论与展望

5．1 全文结论

5．2 展望

参考文献

致谢

攻读硕士学位期间所获得的科研成果