基因转染上调表达Smad7对大鼠腹膜炎模型局部炎症的影响

摘要

研究证明细菌入侵或迁移至腹腔以及腹膜透析液的生物不相容性，包括低pH值、高浓度葡萄糖和葡萄糖降解产物(GDP)等，都可导致腹膜的炎症。探索炎症反应所致的细胞因子瀑布链式反应及其分子机制，具有重大的科学意义。　　TGF-β1/Smad与NF-κB信号通路是参与调节炎症反应的两大信号系统，在炎症反应过程中均可高度活化，但其功能相反：TGF-β1/Smads信号系统的活化下调炎症反应的水平；而NF-κB信号系统的活化上调炎症反应的水平。有研究表明，TGF-β1/Smad与NF-κB信号通路通过多种机制相互调节。一方面，活化的NF-κB通过与R-Smad竞争共激活子p300，对TGF-β1/Smad信号通路产生竞争性抑制的作用；而NF-κB信号通路的活化，又上调表达TGF-β1/Smad信号通路中的抑制性蛋白Smad7，后者通过与Smad竞争与TGF-β受体Ⅰ的结合以及降解TβRⅠ两种方式来抑制TGF-β1/Smad信号通路的活化；另一方面，TGF-β1还可以上调IκB的基因表达和蛋白水平，进而抑制NF-κB的活化。　　已经证明，TGF-β1/Smad信号通路的活化在组织器官纤维化的发生发展过程中起着关键性作用，而Smad7是TGF-β1/Smad信号通路的抑制性蛋白，因此，上调表达Smad7可以抑制纤维化的发生。目前已经在肺纤维化、肝纤维化、肾纤维化以及皮肤纤维化等动物模型中证实：Smad7的上调表达可以显著地减轻组织的纤维化并减轻纤维化过程中的炎症细胞浸润。　　本文通过建立大鼠急性细菌性腹膜炎的模型，应用超声微泡介导的质粒转染方法上调Smad7在大鼠腹膜组织的表达，探讨Smad7在腹膜炎症中的作用和可能机制，以及对腹膜功能的影响，为临床防治腹膜透析相关性腹膜炎以及腹膜纤维化提供实验依据。

目录

文摘

英文文摘

前言

第一章大鼠急性细菌性腹膜炎模型的建立

第二章超声微泡系统介导Smad7质粒转染在大鼠腹膜组织中的应用

第一节超声微泡系统介导Smad7质粒在腹膜组织转染效率的测定

第二节上调大鼠腹膜组织Smad7表达的最佳质粒浓度

第三节Smad7在大鼠腹膜组织高表达的持续时间

第三章上调表达Smad7对大鼠腹膜炎模型局部炎症的影响

3.1实验材料

3.2实验方法

3.3结果

3.3.1腹膜组织Smad7的表达

3.3.2腹膜局部的炎症反应

3.3.3腹腔液细菌菌落计数

3.3.4腹膜超滤功能和转运功能

3.3.5腹膜功能的改变与腹水细胞计数和细菌菌落计数的相关性分析

3.3.6腹膜间皮细胞TGF-β1/Smad7信号通路的活化

3.4讨论

3.6小结

结论

参考文献

附录1:英文缩写词表

附录2:所用试剂的配方

附录3:攻读博士学位期间发表的论文

附录4:攻读博士学位期间参加的学术会议

致谢

原创性声明