肿瘤相关巨噬细胞在晚期上皮性卵巢癌组织中的浸润及与预后的关系

摘要

巨噬细胞在机体内具有重要的生物学作用，不仅参与非特异性免疫防御，而且是特异性免疫应答中一类关键的细胞，广泛参与免疫应答、免疫效应与免疫调节。传统的免疫学认为，巨噬细胞构成机体肿瘤免疫的重要一环。激活的巨噬细胞能有效地发挥杀瘤效应。以往人们对巨噬细胞正向作用的研究比较多，但近年来大量研究发现，在多种恶性肿瘤组织中都有巨噬细胞的浸润(肿瘤相关巨噬细胞Tumor-Associated Macrophages，TAM)。并且，在肺癌<'[2]>、乳腺癌<'[3,4]>等肿瘤组织中，TAM不仅不能清除肿瘤，反而主动抑制机体免疫应答，在肿瘤的发生、进展和转移等过程中起了促进作用。TAM浸润密度较低的肿瘤患者具有较低的复发率和较长的生存期。然而，目前尚无关于卵巢癌组织中TAM浸润密度及其预后的研究。 本研究拟通过免疫组化的方法检测晚期上皮性卵巢癌肿瘤组织中的巨噬细胞的数量，了解肿瘤组织内的巨噬细胞浸润密度，并与卵巢良性病变组织中巨噬细胞浸润密度进行比较，了解两组间有无差异，并分析其差异的意义；同时，通过对影响卵巢癌预后的临床病理因素的多因素分析，初步探讨TAM浸润对卵巢癌患者生存和预后的影响。 材料与方法: 选取中山大学附属肿瘤医院1990-2002年间收治的Ⅲ期-Ⅳ期卵巢癌患者67例作为研究组，病例选择标准：病理证实为上皮性卵巢癌，在行肿瘤细胞减灭术前未接受放化疗，有完整的临床和随访资料。选取同期因卵巢肿物行手术切除的22例卵巢良性病变的标本，作为良性病变组。 对上述卵巢组织石蜡标本进行切片，应用免疫组化方法检测组织中巨噬细胞浸润的情况，观察癌组织及周围邻近间质中RAM最密集的区域(Hot Spot)，在400倍光镜下计数5个视野中的TAM，取平均值记为该标本中TAM的浸润情况。比较卵巢癌组与良性病变组的巨噬细胞浸润数量，分析卵巢良恶性组织中巨噬细胞浸润的区别;卵巢癌组中按巨噬细胞浸润密度的高低将其分为高密度和低密度两个亚组，分析两亚组间总生存率是否有差异，从而探讨卵巢癌中巨噬细胞浸润密度对预后的影响，并对影响预后的多个临床病理因素用COX模型进行多因素分析。 所有数据采用SPSS V13.0软件包进行分析，以P≤0.05为统计学有显著性差异。 结果: 1．免疫组化染色成功的89例卵巢癌组织及卵巢良性病变组织中均能见到TAM浸润。在卵巢癌组织中TAM密集浸润，在卵巢良性病变组织中稀疏散在浸润。 2．67例卵巢癌标本与22例卵巢良性病变标本中TAM浸润密度的比较，卵巢癌中TAM平均密度是57.7/400×HP，良性病变组TAM平均密度是25.3/400×HP，两组间比较差异有统计学意义(P≤0.01)，即在卵巢癌组织中TAM浸润较良性病变组织中多。 3．67例卵巢癌以TNM浸润密度的中位数为界，将其分为TAM低密度组与TAM高密度组，低密度组平均生存时间是129.2±12.3个月，五年累积生存率为73.3﹪；高密度组平均生存时问是69.1±11.6个月，五年累积生存率为41.2﹪。用Log-Rank法两两比较差异有统计学意义(P=0.01)，即在本组晚期上皮性卵巢癌中TAM低密度浸润患者的生存率及生存时间均较TAM高密度者高。 4．对卵巢癌组病例的各种临床病理特征与TAM浸润的关系进行单因素分析，发现TAM浸润在本组上皮性卵巢癌Ⅲ期与Ⅳ期患者之间无显著性差异，但与病理类型、组织学分级和患者年龄有关，在浆液性癌、中低分化癌及年龄大于40岁患者的癌组织中TAM浸润较明显。 5．对卵巢癌组进行单因素生存分析，结果显示术后残留癌灶大小、肿瘤病理类型和TAM浸润密度均为影响患者生存的因素；将FIGO分期、术后残留病灶大小、病理类型、年龄、术后化疗疗程、组织学分级及TAM浸润密度等临床病理因素进行多因素分析显示：组织学分型及TAM浸润的密度是影响晚期上皮性卵巢癌生存的独立的预后因子。 结论: 1．晚期上皮性卵巢癌组织中TAM明显浸润，浸润密度较卵巢良性病变高。 2．晚期上皮性卵巢癌中TAM浸润密度与肿瘤病理类型、组织学分级及患者年龄有关。 3．晚期上皮性卵巢癌TAM高密度浸润状态提示预后不良，是影响生存的独立因素。

目录

文摘

英文文摘

第一章前言

1.1背景

1.2本研究的目的和意义

第二章研究方法

2.1研究对象

2.1.1卵巢癌组

2.1.2卵巢良性病变组

2.2临床资料收集及随访

2.3免疫组织化学检测

2.3.1免疫组化技术及TAM的单克隆抗体

2.3.2实验试剂与药品

2.3.3主要实验仪器

2.3.4免疫组化检测方法和步骤

2.3.5免疫组化结果判定

2.4统计学方法

第三章结果

3.1临床病理特征

3.2卵巢癌组织中TAM浸润情况

3.3卵巢良性病变组中卵巢组织巨噬细胞浸润情况

3.4卵巢癌组与卵巢良性病变组TAM浸润密度的比较

3.5 TAM低密度组与TAM高密度组卵巢癌患者的生存情况

3.6卵巢癌患者临床病理特征与TAM浸润的关系

3.7卵巢癌患者生存的单因素分析

3.8卵巢癌患者预后的多因素分析

第四章讨论

4.1卵巢肿瘤组织中TAM的浸润及其功能

4.2 TAM浸润对卵巢癌患者预后的影响和可能的机理

4.3 TAM浸润与卵巢癌的治疗

4.4展望

第五章结论

参考文献

部分词汇英中文对照表

致谢