去卵巢对大鼠淋巴细胞线粒体机能及血清免疫球蛋白的影响

摘要

背景：衰老是机体代谢过程中的一个必然阶段，是一种复杂而必然的生物学过程，可表现出一系列特征性的改变，如器官的生化、结构和功能衰退，生理功能的逐渐降低和对环境的刺激的适应能力减弱以至丧失等，最终导致对疾病易感性和易受损性。衰老过程中可出现一系列退行性疾病，如老年性痴呆、骨质疏松、心血管疾病、干燥综合症和风湿性关节炎等。目前关于衰老的机制主要有氧化应激、能量衰竭、兴奋性毒性、炎症以及细胞凋亡等学说。其中线粒体机能减退和能量衰竭在衰老的发展中可能起着重要的作用。 流行病学调查显示，女性围绝经期后，机体进入体加速衰老时期，约85％的女性各系统均出现不同程度的功能紊乱，退行性疾病的发病率明显增加，并且女性显著高于男性。雌激素在系统性红斑狼疮发生机制中的作用早已被重视，在患者妊娠期间，随雌激素水平增高而病情加重，绝经后则明显缓解，雌激素水平下降也导致蛋白质“RbAp”活跃，最终引发干燥综合征。这说明雌性激素与免疫系统之间存在着某种关系，性激素尤其是雌激素对免疫系统的作用也越来越受到重视。 长期以来，对于雌激素撤退影响免疫系统的研究表明，雌激素撤退可引起免疫器官的改变，包括使胸腺增生、脾细胞更容易凋亡、淋巴结增大，也会引起免疫细胞的改变，比如，外周血淋巴细胞减少，CD4+/CD8+的比例下降，Th1/Th2比例增加等。近年来，关于AD发病的线粒体损伤学说为人们开启了一片新的视野。线粒体损伤导致的能量代谢障碍，进而引起各器官退行性病变，包括免疫系统。围绝经期或绝经初期，雌激素水平起伏不定并趋于下降，机体免疫力也在不断变化，本实验通过去势手术模拟绝经初期的雌激素变化，从线粒体机能的角度探索雌激素撤退后淋巴细胞机能的变化，以及雌激素撤退后免疫系统退变的可能机制。 目的：本实验建立去卵巢(Ovariectomized，OVX)大鼠模型模拟女性围绝经期或绝经初期免疫系统的变化情况，通过，①观察雌激素撤退后淋巴细胞线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential，ΔΨm)以及ATP含量的变化情况；②观察雌激素撤退后血液中各种免疫球蛋白(immunoglobulin，Ig)的改变。初步探讨雌激素撤退对免疫系统的影响，以及围绝经期后机体免疫功能减退的线粒体机制。 方法：雌性SD大鼠共47只，用完全随机分组法分为3组，①假手术组，分别存活3、6、9、15天，各5只大鼠；②去卵巢组，分别存活3、6、9、15天，各5只大鼠；③空白对照组，7只大鼠。采用免疫比蚀法检测血清中免疫球蛋白IgG，IgM，IgA含量，反相高效液相色谱法检测淋巴细胞线粒体ATP含量，和流式细胞仪检测淋巴细胞线粒体ΔΨm。 结果： 1、线粒体ATP:与sham组相比较，OVX—3d组线粒体ATP含量比sham—3d组低28.07％(P<0.05)，然后两组ATP含量均随时间增长，且OVX组增高更显著，OVX—9d组比sham—9d组高31.43％(P<0.05)，之后两组均随时间延长而降低，且OVX组降低更显著，OVX-15d比sham-15d组低23.53％(P<0.05)。 2、线粒体ΔΨm：去势初期OVX组和sham组ΔΨm均显著增高，与sham组相比较，OVX—3d组比sham—3d组高63.49％(P<0.05)，之后两组含量均随时间降低，且OVX组降低更显著，OVX-15d比sham-15d组低27.42％(P<0.05)， 3、血清IgG：与Sham组相比较，OVX组手术后IgG含量升高更快，OVX—3d比Sham—3d组高53.61％(P<0.05)，之后两组均随时间延长而降低，且OVX组下降更明显，OVX-15d比sham-15d组低42.91％(P<0.05)。 4、血清IgA:与Sham组相比较，OVX组手术后IgA含量升高更快，OVX—6d比Sham—6d组高29.07％(P<0.05)，之后两组IgA含量均随时间延长而下降，且OVX组下降更明显，OVX-15d组比sham-15d组低56.07％(P<0.01)。 5、血清IgM:与Sham组相比较，OVX组与sham组IgM含量初期均随时间增高，6d时达顶峰，之后两组IgM含量均随时间下降，且OVX组下降更显著，OVX—9d组比sham—9d组低32.82％(P<0.05)，OVX-15d组比sham-15d组低25.88％，(P<0.01)。 结论： 1.大鼠去势初期，淋巴细胞线粒体ATP含量第3天时降低，线粒体膜超级化，Δψm升高，第6天时ATP含量增高，Δψm降低，第9天时两者持续降低，第15天时两指标均显著低于假手术组。显示雌激素撤退可引起淋巴细胞线粒体机能短暂的代偿，但长期仍表现为线粒体机能的下降。 2.大鼠去势后血清免疫球蛋白含量IgG，IgM，IgA均呈先增高后降低的变化趋势，显示雌激素撤退可引起体液免疫短暂的代偿，但长期仍表现为免疫力下降。与淋巴细胞线粒体机能的变化趋势较一致。 3.上述结果提示雌激素撤退后，免疫系统机能退变可能与线粒体机能紊乱有关。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：英文缩略词表

声明

前言

材料与方法

结 果

讨论

小 结

参考论文

致谢