微淋巴管及微血管密度在宫颈癌前病变及早期宫颈癌中的表达研究

摘要

研究背景：近年来微淋巴管(Iymphatic microvessel)在宫颈癌变中所起到的作用日渐受到学者们重视。本课题即通过标记宫颈病变及早期癌变过程中的微淋巴管密度(Iymphaticmicrovessel density，LVD)相应不同程度变化，并与微血管密度(microvesseldensity，MVD)比较，探索两者与临床病理的相关性，进一步分析两者在宫颈CIN病变至癌变过程中的变化规律，为宫颈癌变过程寻找更为有利的观测指标。
　　 研究目的：本课题通过免疫组化的方法测定LVD及MVD在不同程度宫颈CIN病变及早期癌变中的数量，分析比较其与病理相关性及在临床分期中的变化趋势，为MVD及LVD在宫颈CIN至癌变过程中所起到的作用提供理论依据。
　　 材料与方法：选取共47例组织标本，其中宫颈CIN分为CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ组，宫颈癌分为Ia(Ia1、Ia2)、IB(Ib1、Ib2)Ⅱa组。每个病例做连续切片，采用免疫组化(immunohistochemical，IHC)的方法，分别用淋巴管透明质酸受体1(LYVE-1)标记微淋巴管，CD3 1标记微血管，计算方法为低倍镜下寻找“热点区(hotspot)”后，取3个高倍镜视野下微淋巴管及微血管个数的平均值，即为该例的LVD和MVD。根据微淋巴管的位置进行如下分组：宫颈CIN分为①CIN病灶内LVD(intra-focus LVD，IFLVD)、②CIN病灶周围2mmLVD(peripheral focus LVD，PFLVD，记为PFLVD2mm)、③CIN病灶周围2-5mmLVD(记为PFLVD5mm)，宫颈癌分为④癌灶内LVD(intratumoral LVD,ILVD)、⑤癌灶周围2mmLVD(peritumoral LVD 2mm，PLVD2mm)、⑥癌灶周围2-5mmLVD(记为PLVD5mm)组共六组。同法将微血管分为如下六组：①CIN病灶内MVD(intra-focus MVD，IFMVD)、②CIN病灶周围2mm MVD(peripheral focus MVD，PFMVD，记为PFMVD2mm)、③CIN病灶周围2-5mmMVD(记为PFMVD5mm)，宫颈癌分为④癌灶内MVD(intratumoral MVD,IMVD)、⑤癌灶周围2mmMVD(peritumoral MVD 2mm，PMVD2mm)、⑥癌灶周围2-5mmMVD(记为PMVD5mm)组。
　　 结果:
　　 1、微淋巴管(lymphatic microvessel，LV)在宫颈CIN中分布在距离上皮基底层病灶2mm、5mm范围内均可见，CIN病灶内未见LV，其形态为棕黄色的单层内皮细胞形成的散在的、孤立的管腔结构，其内无血细胞，其中病灶周围PFLV2mm组与PFLV5mm组范围内微淋巴管的形态相似。在宫颈癌组中，病灶内LV极少见，癌灶周围2mm、5mm范围内，LV均可见，数量分布较多，其中癌灶周围PLV5mm组LV形态形态与PLV2mm组相似，为圆形、扩张的管腔，内不含血细胞。
　　 2、微血管(microvessel，MV)在宫颈CIN组中病灶内未见阳性结构，病灶2mm、5mm范围内均可见，形态为棕黄色的单层内皮细胞形成的散在具有明显的管腔结构，内有血细胞，其中病灶周围PFMV2mm组范围内微血管多呈圆形管腔；PFMV5mm组范围内的微血管与PFMV2mm组类似。在宫颈癌中癌灶内、癌灶旁PMV2mm组、PMV5mm组内均可见棕黄色单层内皮细胞结构围成的管腔结构，其中癌灶内亦呈现出管腔细小、甚至为线状单层上皮围绕的血管，癌灶周围PMV2mm组范围内微血管形态其管壁厚薄不一，较同位置微淋巴管的管壁稍厚，形态完整，管腔结构可见扩张。
　　 3、在所有LVD组中，P(F)LVD2mm组中LVD最高(P=0.000)。从CINⅠ至Ⅰb2+Ⅱa这一系列宫颈病变进展过程中，P(F)LVD2mm呈递增趋势，各组间LVD值具有统计学差异(P=0.000)；从CINⅡ至Ⅰb2+Ⅱa这一系列宫颈病变进展过程中，P(F)LVD5mm也呈递增趋势，各组间LVD值亦具有统计学差异(P=0.000)。宫颈CIN中：PFLVD2mm随CIN级别递增而明显增加，两者密切相关，相关系数为r=0.880(P=0.000)，CINⅡ组较CINⅠ组PFLVD2mm显著增加(P=0.007)，CINⅢ组较CINⅡ组PFLVD2mm亦显著增加(P=0.001)；对于PFLVD5mm的测量，CINⅢ组较CINⅡ组中的PFLVD5mm亦显著增加(P=0.002)。在早期宫颈癌中PLVD2mm随FIGO分期递增而增加，两者相关系数为r=0.598(P=0.001)，但Ⅰa1组与Ⅰa2+Ⅰb1组PLVDmm之间无明显差异(P=0.797)，Ⅰb2+Ⅱa组较Ⅰa2+Ⅰb1组PLVD2mm增加显著(P=0.001)；PLVD5mm不随FIGO分期递增而增加，两者不相关，r=0.146(P=0.467)，Ⅰa1组、Ⅰa2+Ⅰb1组与Ⅰ b2+Ⅱa组之间无明显差异(P=0.136)。
　　 4、关于LVD位置比较：宫颈CINⅢ中：PFLVD2mm组＞PFLVD5mm组＞ILVD组(P=0.025)；宫颈癌Ⅰb2+Ⅱa组中：PLVD2mm组＞PLVD5mm组＞ILVD组(P=0.002)，而CINII、Ia1、Ⅰa2+Ib1组中P(F)LVD2mm与P(F)LVD5mm相比，并没有显著性差异，P值分别为0.062,0.375，0.318。
　　 5、在所有MVD组中，P(F)MVD2mm、P(F)MVD5mm中MVD显著高于其它IMVD组(P=0.000)。从CINⅠ至Ⅰb2+Ⅱa这一系列宫颈病变进展过程中，P(F)MVD2mm呈递增趋势，各组间MVD值具有统计学差异(P=0.000)；从CINⅡ至Ⅰb2+Ⅱa这一系列宫颈病变进展过程中，P(F)MVD5mm也呈递增趋势，各组间MVD值亦具有统计学差异(P=0.000)；从Ⅰa1至Ⅰb2+Ⅱa的宫颈癌进展过程中，IMVD也成递增趋势，各组间MVD值亦有统计学差异(P=0.004)。宫颈CIN中：PFMVD2mm虽随CIN级别递增而呈增加趋势，但两者无明显相关，r=0.224(P=0.343)，CINⅠ，CINⅡ，CINⅢ组之间PFMVD2mm值无明显差异(P=0.637)，与同位置的LVD相比，PFMVD2mm组明显大于PFLVDmm组(P=0.001)；对于PFMVD5mm的测量，CINⅢ组较CINⅡ组PFMVD5mm亦无明显增加(P=0.424)，与同位置的LVD相比，PFMVD5mm组明显大于PFLVD5mm组(P=0.000)。在早期宫颈癌中IMVD组随FIGO分期呈递增趋势，两者具有相关性，r=0.647(P=0.000)，但Ⅰa2+Ⅰb1组较Ⅰa1组递增不明显(P=0.363)，Ⅰa2+Ⅰb1与Ⅰb2+Ⅱa递增明显(P=0.002)，相对于癌灶内的LV，癌灶内MVD显著大于癌灶内LVD(P=0.000)；PMVD2mm组随FIGO分期呈递增趋势，两者具有相关性，r=0.691(P=0.000)，Ⅰa2+Ⅰb1组较Ⅰa1组递增明显(P=0.033)，Ⅰa2+Ⅰb1与Ⅰb2+Ⅱa递增明显(P=0.005)，相对于同位置的LVD，MVD显著大于LVD(P=0.000)；PMVD5mm组随FIGO分期呈递增趋势，两者具有相关性，r=0.656(P=0.000)，Ⅰa2+Ⅰb1组较Ⅰa1组递增明显(P=0.040)，Ⅰa2+Ⅰb1与Ⅰb2+Ⅱa递增明显(P=0.011)，相对于同位置的LVD，MVD显著大于LVD(P=0.000)。
　　 6、关于MVD的位置比较：宫颈CIN中，IFMVD不表达，PFMVD2mm、PFMVD5mm之间无统计学差异，具体为CINⅡ为P=0.562，CINⅢ为P=0.418；早期宫颈癌中，各组中病灶周围微血管密度均显著大于病灶内微血管密度，而各组中PMVD2mm与PMVD5mm表达未见明显差异，P值分别为0.901，0.846,0.859。
　　 7、癌灶中，PLVD2mm、PLVD5mm组，PMVD2mm、PMVD5mm组组织学分级、病理学分型、淋巴结转移、是否绝经无明显关系(P＞0.05)。8、在预测宫颈CIN至宫颈癌Ⅰa1-Ⅱa过程中，P(F)LVD2mm与P(F)MVD2mm呈正相关性。
　　 结论:
　　 1、P(F)LVD2mm、P(F)MVD2mm及P(F)MVD5mm与CIN分级、FIGO分期相关，与是否绝经、病理类型、组织学分级、淋巴结转移未见明显相关性。
　　 2、宫颈CIN中，PFLVD2mm、PFLVD5mm随着CIN分级的升高而升高，尤其是前者相关性更高，可作为CIN疾病发展的预测指标之一。
　　 3、早期宫颈癌中MVD(包括IMVD、PMVD2mm、PMVD5mm)随着宫颈癌分期的增加而升高，而PMVD2mm与PMVD5mm与宫颈癌FIGO分期相关性更高，可作为早期宫颈癌发展的预测指标之一。
　　 4、在宫颈CINⅠ至早期宫颈癌Ⅱa的疾病进展过程中病灶周围微淋巴管PFLVD2mm与病灶周围微血管PMVD2mm的对疾病进展的预测具有正相关性。

目录

文摘

英文文摘

声明

第一章 引言

第二章 论文正文

材料与方法

实验结果

讨论

结论

创新之处

有待于进一步探讨的问题

参考文献

附录

综述：微淋巴管在宫颈CIN到早期宫颈癌中作用的研究进展

致谢