Apelin-13对3T3-L1脂肪细胞AQP7表达的影响

摘要

背景：
　　随着社会的发展和人们生活方式的改变，目前肥胖症（obesity）在世界范围内已形成流行趋势。肥胖与冠心病、高血压、2型糖尿病及血脂紊乱等许多代谢性疾病关系密切。现有的减肥途径包括饮食控制、运动锻炼、减肥药物等，但现实是，患者往往难以坚持严格的饮食控制和规律的运动，副作用多、疗效不持久等限制了减肥药的长期应用。因此，探索一条具有远期疗效和安全性的减肥途径具有重要的现实意义。肥胖产生的关键在于能量摄入大于消耗，剩余的能量以甘油三酯（Triglyceride，TG）蓄积的形式贮存体内，最后导致脂肪细胞肥大和数量增多。因此，减少脂肪细胞内TG蓄积是治疗肥胖的关键所在。
　　研究发现，脂肪细胞内TG分解成游离脂肪酸（Free fatty acid，FFA）与甘油，甘油通过水通道蛋白-7（Aquaporin7，AQP7）向胞外排泄，从而减少胞内TG的合成，这为肥胖症的防治提供了新的研究方向。我们试图从细胞脂肪因子调控的角度寻找影响脂肪细胞AQP7基因表达的上游信号调控因子。而Apelin作为一种脂肪因子（adipocykine）与能量代谢之间存在密切关系。在肥胖和胰岛素抵抗小鼠中，Apelin能增加骨骼肌对葡萄糖的摄取利用、提高胰岛素敏感性、降低血浆胰岛素、甘油三酯及游离脂肪酸浓度、减小脂肪细胞体积、减轻小鼠体重。上述研究提示：Apelin可能在肥胖症的发生、发展中发挥作用。
　　脂肪细胞内TG分解成FFA与甘油后，若不能及时被排至胞外代谢，将导致脂肪细胞内TG重新合成，产生肥胖。而Apelin已证实能减小脂肪细胞内TG的含量，鉴于AQP7有助于脂肪细胞内甘油向外排泄，减少TG合成，因此我们提出以下假说，Apelin能促进脂肪细胞AQP7高表达，从而减少脂肪细胞内TG的蓄积，最终达到减肥效果。
　　本课题以成熟3T3-L1脂肪细胞为研究对象，用油红O染色鉴定，在不同浓度和时间的Apelin-13作用下从转录水平检测3T3-L1脂肪细胞AQP7表达水平，从而探讨Apelin-13与AQP7表达之间的关系，为后续相关减肥机制奠定基础。
　　目的：
　　探讨脂肪因子Apelin-13对3T3-L1脂肪细胞AQP7基因表达的剂量和时间关系。
　　方法：
　　以体外培养3T3-L1脂肪细胞为研究对象，油红O染色鉴定，分别以不同浓度（0、10-9、10-8、10-7、10-6M）Apelin-13组和10-5M罗格列酮阳性对照组干预24h、10-7M Apelin-13干预不同时间（0、12、24、36、48h）后，提取细胞的总RNA，用RT-PCR法检测AQP7 mRNA表达水平。
　　结果：
　　3T3-L1脂肪细胞胞内脂滴油红 O染色均呈红色。在浓度组中，阳性对照组与阴性对照组之间存在显著差异（P<0.05）；与阴性对照组比较，10-8、10-7M Apelin-13能显著刺激AQP7mRNA表达（P<0.05）；10-8、10-7M Apelin-13组与阳性对照组比较，10-7M Apelin-13能显著刺激AQP7mRNA表达（P<0.05）；10-8、10-7M Apelin-13两组之间无统计学差异。在时间组中，10-7M Apelin-13的12、24、36h组AQP7mRNA表达较0h组能显著刺激AQP7 mRNA表达( P<0.05)，作用24h表达最高；但12、24、36h三组AQP7mRNA表达之间无统计学差异。
　　结论：
　　Apelin-13在一定程度上能增加3T3-L1脂肪细胞AQP7 mRNA表达的水平，并分别以10-7M和24h为最佳作用浓度和时间。

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第一章 前 言

第二章 材料与方法

2.1实验材料

2.2 实验方法

2.3统计方法

第三章 实验结果

3．1 3T3-L1前脂肪细胞的诱导分化

3.2 Apelin-13对3T3-L1脂肪细胞AQP7mRNA表达的影响

第四章 讨论

第五章 结论

参考文献

综述

一．脂肪细胞的脂肪代谢

二．AQP7与甘油代谢

三、AQP7与肥胖

参考文献

在校期间发表论文情况

本人简历

致谢