慢性粒细胞白血病患者血浆中可疑病毒序列的检测

摘要

一.研究背景：
　　白血病是造血组织常见的恶性肿瘤疾病。迄今为止,包括慢性粒细胞白血病(Chronic myeloid leukemia,CML)在内的大多数白血病的病因及发病机理仍未明了。成人T细胞性白血病/淋巴瘤(Adult T-cell Leukemia/Lymphoma,ATLL)与人T细胞白血病病毒(Human T-cell Leukemia Virus Type-1,HTLV-1)之间的病因学关系早已得到证实,其它类型的白血病曾经被怀疑是由病毒感染所致。然而,与这些白血病相关的病毒却一直未得到分离和鉴定。我们以往的初步实验及其它一些研究结果提示,病毒感染在慢性粒细胞白血病的发生和发展中可能扮演着重要的角色。
　　二.目的和方法：
　　为探讨病毒感染与慢性粒细胞白血病之间的关系,本研究以七例慢性粒细胞白血病患者为研究对象,分别从各患者的血浆中提取RNA,DNase处理后,用随机引物经逆转录合成cDNA,双链cDNA片段化后进行454高通量测序。测序结果和GeneBank已公布的所有序列进行BLAST(Basic Local Alignment Search Tool)比对,以鉴别出其中与病毒具有同源性的序列。
　　三.结果：
　　慢性粒细胞白血病患者外周血454分析结果显示:
　　1)454测序在慢性粒细胞白血病患者血浆中能检测到长的序列片段,读长大约集中在200-500bp;
　　2)进行BLAST比对后发现上述大部分序列来自于真核生物的基因组,少数和病毒、细菌等微生物有较高相似性,此外还有部分与目前已知的所有序列都没有同源性;
　　3)单独分析和病毒具有同源性的序列,发现这些序列主要来自于逆转录病毒科、疱疹病毒科、乳头瘤病毒科及多瘤病毒科。个别病人血浆中还同时携带有肝炎病毒的核酸物质。
　　四.结论：
　　本研究结果初步表明,慢性粒细胞白血病的发生和病程进展可能与病毒感染有关,但到底是病毒感染导致了慢性粒细胞白血病的发生,还是慢性粒细胞白血病患者的体质改变方便了病毒的入侵;不同疾病发展阶段的患者和健康人所携带的病毒谱和序列特征是否相同;是单一病毒还是多种病毒协同作用,谁因谁果,还有待进一步研究证实。深入了解病毒感染与慢性粒细胞白血病的关系,可能会为该病的诊断与防治带来新的思路。

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第1章 前言

1.1 慢性粒细胞白血病研究背景

1.2 慢性粒细胞白血病的细胞遗传学改变

1.3 慢性粒细胞白血病中microRNA的研究

1.4 染色体易位与慢性粒细胞白血病

1.5 病毒感染和白血病

1.6 本研究的目的和意义

第2章 材料和方法

2.1主要试剂及器材

2.2 实验方法

第3章 结果

3.1 P4P病人测序结果

3.2 P5P病人测序结果

3.3 P16P病人测序结果

3.4 P43P病人测序结果

3.5 P30P病人测序结果

3.6 P52P病人测序结果

3.7 P54P病人测序结果

3.8 7份测序标本汇总表

3.9 健康人血浆及白细胞中可疑病毒序列的检测

3.10 统计分析

第4章 讨论

4.1核酸提取方法的选择

4.2检测与测序方法的选择

4.3 逆转录病毒、疱疹病毒、乳头瘤病毒及多瘤病毒与慢性粒细胞白血病的相关性

第5章 结论与展望

参考文献

综述慢性粒细胞白血病中相关融合基因的研究进展

参考文献：

附录

在学期间发表论文情况

致谢

个人简历