甘草中光甘草定的提取工艺及药理活性研究

摘要

目的：
　　光果甘草中的特有成分光甘草定，具有调节免疫、降血脂、降血糖、类雌激素、抗菌、抗氧化等作用，在美容界，更是有“美白黄金”之称，是近年甘草研究的热点。本课题着重研究甘草中的光甘草定，由于甘草产地众多，筛选光甘草定含量较高的甘草产地就显得尤为重要。本课题从国内外共21处，购买当地甘草，进行含量测定，并对其进行质量标准评价。同时采用正交实验设计，对光甘草定提取工艺进行优化，为进一步纯化光甘草定提供科学依据。按照优化的提取工艺，对含量较高产地的甘草进行提取、纯化，得到光甘草定粗提物，并对光甘草定进行体外抗氧化活性和抗炎实验研究，考察其药理活性。
　　材料方法：
　　1.采用高效液相色谱法，以光甘草定为对照品，对21个不同产地的甘草进行含量测定，并进行质量评价研究。
　　2.以光甘草定的含量为指标，对甘草的提取溶剂进行考察，以筛选出最佳提取溶剂。
　　3.以光甘草定的含量为指标，对甘草中光甘草定的提取工艺进行正交实验，分别从提取时间、药液比、提取次数三方面进行优化，以筛选出最佳提取工艺。
　　4.采用大孔吸附树脂以及聚酰胺树脂技术，对甘草提取物进行纯化分离。
　　5.从抗氧化以及抗炎两方面对光甘草定粗提物进行药理活性研究。
　　结果：
　　1.采用高效液相色谱法，对国内外21个不同产地的甘草进行光甘草定含量测定，结果不同产地甘草中光甘草定的含量差异明显，哈萨克斯坦南部地区的甘草中光甘草定的含量较高，约为0.23％。
　　2.以光甘草定的含量为指标，对提取溶剂进行考察，结果光甘草定的最佳提取方法为水提后药渣95%的乙醇提取，可以得到含量较高的提取物，含量约为1%。
　　3.以光甘草定的含量为指标，对光甘草定的提取工艺进行正交实验，结果光甘草定的最佳提取工艺为提取次数2次，提取时间2 h，料液比1:10，得到含量约为1.30%的提取物。
　　4.对大孔吸附树脂洗脱工艺进行优化，并采用聚酰胺树脂技术，对甘草提取物进行纯化，纯化后，光甘草定粗提物中光甘草定的含量为57.79%。
　　5.光甘草定粗提物进行抗氧化实验，发现有明显的抗氧化作用，根据量效曲线，确定了IC50，其中光甘草定粗提物清除羟基自由基（·OH）的IC50为0.387 mg·mL-1；清除超氧自由基（O2-·）的IC50为9.304 mg·mL-1。抗炎活性研究表明，光甘草定粗提物对二甲苯诱导的小鼠耳肿胀有显著的抑制作用。
　　结论：
　　1.采用高效液相色谱法，从国内外21个不同产地中，筛选出光甘草定含量最高的甘草产地，可以为光甘草定的研究提供依据。
　　2.优化光甘草定的提取溶剂，水提后的药渣95%醇提，增大了甘草药渣的再利用价值。
　　3.优化光甘草定的提取工艺，为光甘草定的进一步研究提供依据。
　　4.纯化光甘草定提取物的工艺，使光甘草定的含量显著升高，为光甘草定进一步纯化，以及工业大生产提供可靠数据。
　　5.从抗炎、抗氧化两个方面对光甘草定粗提物进行药效学研究，发现光甘草定粗提物有较好的抗炎、抗氧化活性，为光甘草定药效学研究提供数据。

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前言

综述

第一章 不同产地甘草中光甘草定的含量测定

第一节 三种甘草的鉴别

1. 性状鉴别

2. 显微鉴别

3. 化学成分鉴别

4 讨论与结论

第二节 不同产地甘草

第三节 光甘草定的含量测定

1 仪器与试药

2 方法与结果

3 含量测定

4 讨论与结论

第二章 甘草中提取光甘草定的工艺优化

第一节 提取溶剂优化

1 仪器与试药

2 方法与结果

3 含量测定

4. 结论与讨论

第二节 正交设计法优化光甘草定提取工艺

1 仪器与试药

2 方法与结果

3 正交实验设计及结果

4 工艺验证

5 讨论和结论

第三节 甘草提取物中光甘草定的纯化处理

1 实验材料

2 方法与结果

3 讨论和结论

第三章 光甘草定粗提物药理活性研究

第一节 光甘草定粗提物抗氧化活性研究

1 实验材料

2 方法与结果

3 结果与结论

第二节 光甘草定粗提物抗炎作用研究

1 实验材料

2 方法与结果

3 讨论

结论

参考文献

附录Ⅰ：个人简介

致谢