维生素D受体，白细胞介素-10基因多态性与慢性牙周炎和2型糖尿病易感性的关系

摘要

目的: 通过对维生素D受体和IL-10基因单核苷酸多态性与汉族人群慢性牙周炎和2型糖尿病易感性的关系的研究，进一步探讨慢性牙周炎与2型糖尿病的共同遗传背景。 方法: 收集107例重度慢性牙周炎患者、121名牙周健康对照者、64例单纯2型糖尿病患者（VDR基因组为64例，IL-10基因组为68例）及96例2型慢性牙周炎伴2型糖尿病患者的颊粘膜拭子，以Chelex-100法提取DNA，采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）方法测定VDR基因BsmⅠ、ApaⅠ、TaqⅠ、FokⅠ位点和IL-10基因-1082G/A、-819C/T、-592C/A位点的基因型，分析各疾病组与对照组间基因型、等位基因频率和单倍体频率分布的差异。 结果: 1.VDR BsmⅠ、TaqⅠ、ApaⅠ和FokⅠSNPs检测结果及Hardy-Weinberg平衡检验 VDR BsmⅠ、TaqⅠ、ApaⅠ和FokⅠ各位点PCR产物经相应的限制性内切酶酶切后读取基因型。随机抽取10%的样本，重复检测基因型结果与前完全一致。各位点基因型经PCR产物测序证实与前完全一致。四组资料的基因型频率分布符合Hardy-Weinberg平衡定律（p>0.05）。 2.VDR基因型和等位基因在不同组别分布频率比较 VDR基因BsmⅠ、TaqⅠ、ApaⅠ和FokⅠ位点基因型和等位基因分布频率在四组间差异均无统计学意义（P>0.05）。其中，TaqⅠ位点在四组受检者中基因型分布均以TT纯合子为主，Tt杂合子较少，tt纯合子分别在CP组和DM组中各有一例。BsmⅠ位点在四组受检者中均未发现BB基因型，以bb纯合子占较大比例，Bb杂合子较少。 对四组资料进行性别分层统计，结果显示，VDR基因BsmⅠ、TaqⅠ、ApaⅠ和FokⅠ位点基因型和等位基因分布频率在四组间差异均无统计学意义（P>0.05）。 3.VDR基因各位点间在不同组别的连锁不平衡分析 在2型糖尿病组和健康对照组中BsmⅠ和TaqⅠ位点间、在牙周炎伴2型糖尿病组和健康对照组中BsmⅠ和ApaⅠ位点间均存在较强的连锁不平衡（D'>0.5）。 4.VDR基因BsmⅠ、TaqⅠ和ApaⅠ位点间在不同组别的单倍体型分析 在慢性牙周炎组和健康对照组中，单倍体BTA的频率分布差异有统计学意义，X2=4.219，P＝0.040，OR值为4.066，95%CI=0.960～17.231。在2型糖尿病组和健康对照组中，单倍体Bta的分布差异有统计学意义。单倍体btA仅在对照组中出现，且差异有统计学意义。在牙周炎伴2型糖尿病组和健康对照组中，单倍体btA亦仅在对照组中出现，且差异有统计学意义。在后两组中其总的P值均<0.05。 5.IL-10-1082 G/A、-819 C/T和-592 C/A SNP检测结果及Hardy-Weinberg平衡检验 IL-10-1082 G/A、-819 C/T和-592 C/A各位点PCR产物经相应的限制性内切酶酶切后读取基因型。随机抽取10%的样本，重复检测基因型结果与前完全一致。各位点基因型经PCR产物测序证实与前完全一致。四组资料的基因型频率分布符合Hardy-Weinberg平衡定律（p>0.05）。 6.IL-10基因型和等位基因在不同组别分布频率比较 IL-10基因启动子区-592 C/A位点基因型分布在四组间无统计学差异（X2=9.505，P=0.147），等位基因频率在四组间比较有统计学差异（X2=8.620，P=0.035），进一步两两比较，DP组与对照组间，等位基因频率分布差异有统计学意义（X2=5.742，P=0.017），A等位基因相对于C等位基因OR（95%CI）：=1.692（1.098～2.604）。CP组与对照组，DM组与对照组比较差异均无统计学意义，P>0.017. -1082 G/A位点和-819 C/T位点基因型和等位基因在四组间的分布频率差异均无统计学意义。-1082 G/A位点在四组资料中均未发现GG基因型。基因型以AA纯合子为主，AG杂合子较少。 对四组资料进行性别分层统计，结果显示，在女性受检者中，IL-10基因启动子区-592 C/A位点基因型分布在四组间无统计学差异（X2=8.546，P=0.201），等位基因频率在四组间比较有统计学差异（X2=8.051，P=0.045），进一步两两比较，DP组与对照组比较，等位基因频率分布差异有统计学意义（X2=6.144，P=0.013），A等位基因相对于C等位基因OR（95%CI）：=2.049（1.155～3.636）。CP组与对照组，DM组与对照组比较差异均无统计学意义（P>0.017）。-1082 G/A位点和-819C/T位点基因型和等位基因四组间比较无统计学差异。男性受检者中，各位点基因型和等位基因分布在四组间差异均无统计学意义（P>0.05） 7.IL-10基因各位点间在不同组别的连锁不平衡分析 IL-10基因启动子区-1082 G/A、-819 C/T和-592 C/A位点在各组间均存在较强的连锁不平衡（D'=1.0）。 8.IL-10基因-1082-819-592位点间在不同组别的单倍体型分析 在2型糖尿病组和健康对照组中，单倍体ATA和ATC的频率分布差异有统计学意义（X2=5.688，P=0.017和X2=7.976，P=0.0048），单倍体ATA在2型糖尿病组中频率高于健康对照组。而单倍体ATC则在健康对照组中频率明显高于2型糖尿病组。两组间总的P值为0.017，差异有统计学意义。 在慢性牙周炎伴有2型糖尿病组和健康对照组中，单倍体ATA和ATC的频率分布趋势同2型糖尿病组和健康对照组间相似：单倍体ATA和ATC的频率分布差异有统计学意义，（X2=7.962，P=0.0048和X2=10.659，P=0.0011），单倍体ATA在慢性牙周炎伴有2型糖尿病组中频率高于健康对照组。而单倍体ATC则在健康对照组中频率明显高于疾病组。两组间总的P值为0.0025，差异有统计学意义。 在慢性牙周炎和健康对照组中，各单倍体型的频率分布在两组中差异无统计学意义。 结论: 1.与汉族人群慢性牙周炎遗传易感性相关的因素有：VDR BTA单倍体型。 2.与汉族人群2型糖尿病的遗传易感性相关的因素有：VDR Bta单倍体型；IL-10单倍体ATA。 3.与汉族人群牙周炎伴有2型糖尿病的遗传易感性相关的因素有：IL-10基因启动子区-592 C/A位点A等位基因；单倍体ATA。 4.VDR基因单倍体btA和IL-10基因单倍体ATC可能是汉族人群2型糖尿病和牙周炎伴有2型糖尿病患者的保护因子。

目录

文摘

英文文摘

声明

前 言

第一部分维生素D受体基因多态性与慢性牙周炎和2型糖尿病易感性的关系

1资料和方法

2结果

3讨论

第二部分 白细胞介素-10基因多态性与慢性牙周炎和2型糖尿病易感性的关系

1资料和方法

2结果

3讨论

参考文献

文献综述 维生素D受体，白细胞介素-10基因多态性与慢性牙周炎和2型糖尿病关系的研究进展

附录：

附 图

攻读学位期间的科研和发表文章情况

致 谢

统计学证明