紫杉醇对胶原诱导性关节炎小鼠血管新生抑制作用的研究

摘要

背景：
　　血管新生是类风湿关节炎(rheumatoid arthritis，RA)的重要特征之一，在RA滑膜血管翳的形成和生长中起着核心作用，不可控的新生血管形成可以导致炎细胞浸润、滑膜组织增生，最终导致软骨和骨破坏，因此延缓或阻断RA患者的滑膜血管新生已成为RA治疗的重要靶点之一。胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis，CIA)模型的临床表现、发病机理、病理特征等方面与人RA相似，是研究RA的理想动物模型。本课题用中药红豆杉提取物紫杉醇(taxol，PTX)干预CIA小鼠，研究PTX对CIA小鼠滑膜血管新生的作用。
　　目的：
　　研究PTX对CIA小鼠滑膜血管新生及VEGF、HIF-1α表达的影响。
　　方法：
　　用50只C57BL/6(H-2b)小鼠诱导CIA模型，造模后关节炎评分大于4分的CIA小鼠被随机分为1.5mg/kg PTX组、1.0mg/kg PTX组、0.5mg/kg PTX组及CIA模型组，每组6只，另外6只未造模的正常小鼠作为正常对照组。干预组分别予对应剂量的PTX隔日腹腔注射，对照组予等体积溶媒，共给药8次。运用视觉模拟评分法对小鼠关节炎进行评分;HE染色后对小鼠关节组织进行病理学评分（从滑膜炎、血管翳和骨破坏三个方面评估）;免疫组化法检测关节滑膜组织微血管的密度(microvessel density，MVD)以及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)、低氧诱导因子1α（hypoxia-inducible factor-α，HIF-1α)的表达;ELISA检测小鼠外周血清VEGF和HIF-1α的表达。
　　结果：
　　PTX干预组关节炎评分分别为1.33±0.52、2.00±0.63、3.33±1.03，与CIA模型组（5.67±1.03）比较显著降低，差异均有统计学意义(P＜0.001，P＜0.001，P=0.016)。PTX干预组关节病理总评分分别为2.50±0.66、3.89±0.86、6.22±0.98，呈剂量依赖性减少，与CIA模型组（7.67±0.79）比较显著降低，差异均有统计学意义(P＜0.001，P＜0.001，P=0.007)。并且PTX能明显减少CIA小鼠关节病理滑膜炎、血管翳及骨破坏评分。与CIA模型组（110.32±5.06/mm2）相比，PTX干预组的MVD亦呈剂量依赖性降低（17.05±1.97/mm2，34.73±2.36/mm2，57.55±2.72/mm2，P均＜0.001）。此外，1.5mg/kg PTX组（42.38±3.22）、1.0mg/kgPTX组（74.30±4.14）、0.5mg/kg PTX组（121.69±3.81）滑膜组织的VEGF表达低于CIA模型组（156.22±4.75;P均＜0.001）;1.5mg/kg PTX组（19.93±2.92）和1.0mg/kg PTX组（31.99±5.60）的滑膜组织HIF-1α表达低于CIA模型组（51.10±2.86;P均＜0.001）。1.5mg/kg PTX组（10.70±1.21pg/ml）和1.0mg/kg PTX组（14.75±0.96pg/ml）的外周血清VEGF表达低于CIA模型组（16.40±1.43pg/ml，P均＜0.001），且1.5mg/kg PTX组（2.17±0.43pg/ml）和1.0mg/kg PTX组（3.47±0.51pg/ml）外周血清HIF-1α表达亦低于CIA模型组（5.07±1.19pg/ml，P＜0.001，P=0.032）。MVD与关节病理滑膜炎、血管翳、骨破坏评分及滑膜组织VEGF、HIF-1α的表达水平均呈正相关(r=0.921，r=0.944，r=0.889，r=0.969，r=0.933;P均＜0.001)。
　　结论：
　　PTX能抑制CIA小鼠滑膜血管新生，并降低滑膜组织和外周血清VEGF、HIF-1α的表达水平，PTX可能通过降低VEGF、HIF-1α的表达抑制CIA小鼠滑膜血管生成。

目录

摘要

前言

第—节 紫杉醇对CIA小鼠关节炎及病理评分的影响

1 材料

2 方法与步骤

3 结果

4 讨论

第二节 紫杉醇对CIA小鼠微血管密度及VEGF、HIF-1α表达的影响

1 材料

2 方法与步骤

3 结果

4 讨论

全文小结

参考文献

中英文缩略词对照表

攻读学位期间成果

致谢

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