吲哚美辛对人喉癌Hep-2细胞系的作用研究

摘要

目的：通过体外实验的方法探讨非甾体类抗炎药吲哚美辛对人喉癌Hep-2细胞系生长的抑制作用和侵袭能力的影响,并借观察药物处理后细胞形态学改变来初步探讨药物对细胞分化的作用。
　　方法：1.不同浓度的吲哚美辛作用于人喉癌Hep-2细胞系不同时间后,采用台盼蓝染色法计数活细胞数以检测细胞生长情况,流式细胞仪分析细胞DNA含量,比较亚二倍体峰的变化。
　　2.Hep-2细胞经吲哚美辛作用后,撤药培养,绘制细胞生长曲线,并通过软琼脂集落形成实验检测肿瘤细胞非锚着生长能力,琼脂糖滴法检测肿瘤细胞移动能力,单层细胞侵袭实验计算肿瘤侵袭指数。
　　3.利用相差显微镜,细胞爬片HE染色及透射电镜、扫描电镜,对细胞从整体形态、核形态和超微结构三个层次进行形态学观察。
　　4.利用SPSS11.0统计软件包,对以上结果进行相应的统计分析。
　　结果：1.在100—1000μmol/L吲哚美辛作用下,Hep-2细胞系活力降低,流式细胞仪分析形成明显的亚二倍体峰,并与药物剂量及作用时间有依赖关系。药物剂量及药物作用时间之间存在交互作用,细胞活力与细胞凋亡比率间呈负的直线相关关系。
　　2.250μ mol/L和500μ mol/L吲哚美辛作用后的Hep-2细胞软琼脂集落形成数目减少,细胞移动能力下降,单层细胞侵袭指数降低。
　　3.大剂量(250μ mol/L和500μ mol/L)吲哚美辛处理后的细胞表现出显著的长丝状突起,可见凋亡细胞；小剂量(25μ mol/L和50μ mol/L)吲哚美辛作用后细胞形态均一化,怪核率下降,细胞微绒毛和伪足减少,呈良性转化表现。250μ mol/L吲哚美辛作用后撤药培养的细胞亦有良性转化的趋势。
　　结论：1.吲哚美辛能抑制人喉癌Hep-2细胞系的生长,并诱导细胞凋亡。
　　2.吲哚美辛能抑制人喉癌Hep-2细胞系的侵袭性。
　　3.吲哚美辛促使Hep-2细胞形态良性转化,可能促进细胞的分化。

目录

中文摘要

ABSTRACT

前言

第一部分 吲哚美辛对人喉癌Hep-2细胞系生长的抑制作用研究

材料与方法

结果

结论

第二部分 吲哚美辛对人喉癌Hep-2细胞系侵袭力的影响

材料与方法

结果

结论

第三部分 吲哚美辛对人喉癌Hep-2细胞系形态学影响

材料与方法

结果

结论

讨论

全文结论

参考文献

英文缩略词

附图与说明

附录

致谢