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角膜体外重建异种生物载体材料生物相容性研究

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前言

第一部分 角膜体外重建异种生物载体材料免疫学研究

引言

材料与方法

结果

讨论

第二部分 角膜体外重建异种生物载体材料植入性实验研究

引言

材料与方法

结果

讨论

总结

参考文献

附录1 附图

附录2 部分流式细胞仪结果图

附录3 英文缩写词表

附录4 在校期间发表论文情况

致谢

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摘要

寻找合适的载体材料一直是角膜体外重建急待解决的问题之一。由于这种载体应支持细胞生长,促进细胞粘附,具有良好的组织相容性,以及角膜特有的透明、屈光、透氧等特性。现阶段能符合要求的材料还是考虑天然的同质性材料,我们尝试采用异种(猪)角膜基质作为载体材料,实验探讨其作为载体的可行性。
  目的:分析测定异种(猪)角膜基质组织免疫原性,观察其角膜层间移植后与受体角膜愈合情况,以评价该材料生物相容性,探讨其作为角膜重建载体材料可行性。
  方法:(1) 将新鲜、脱水两种猪角膜基质植片分别植入F344大鼠角膜基质层间,术后12、90天抽取外周血,行anti-rat CD25-FITC和anti-rat CD4/CD8-PE双色免疫荧光标记,流式细胞仪测定分析。(2) 将新鲜、脱水两种猪角膜基质植片分别植入新西兰白兔角膜层间,定期临床观察植片愈合情况,并取受体兔角膜进行组织学观察。
  结果:(1) 测得新鲜组、脱水组大鼠外周血T淋巴细胞CD4+CD25+、CD8+CD25+双阳性表达率及CD4+/CD8+比值与同基因移植组、阴性对照组比较无显著性差异(P>0.05)。(2) 临床观察:全部植片存活,12只术眼未见有角膜水肿混浊、角膜新生血管、排斥反应发生,新鲜植片在2个月左右己透明,脱水植片在6个月后透明。组织学观察:新鲜植片4个月时与兔角膜基质相融愈合,脱水植片经角膜细胞再分布、胶原纤维改建重塑于8个月后与兔角膜基质相融愈合,两组植片愈合过程中未见有淋巴细胞浸润及新生血管生成。
  结论:异种(猪)角膜基质免疫原性低,具有良好的生物相容性,是一种较为理想的角膜体外重建载体材料。

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