脂肪源性ApoE对糖尿病小鼠脂肪组织的生物特性及脂代谢调节的影响

摘要

目的：
　　研究将链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病(DM)ApoE-/-小鼠的白色脂肪移植至其野生型正常及糖尿病小鼠。观察移植后脂肪组织ApoE表达情况；及脂肪细胞形态、脂肪组织脂质含量、脂肪组织主要调节酶系基因表达改变，并与野生小鼠脂肪组织对比。以初步明确脂肪源性ApoE对脂肪组织生物学特性及脂肪代谢的影响和和可能机制。
　　方法：
　　链脲佐菌素(STZ)诱导的野生型糖尿病(WTDM)小鼠、糖尿病ApoE-/-（EKODM）小鼠模型分别为15只、35只；ApoE-/-(EKO)小鼠及野生型(WT)小鼠各为15只。EKODM及WTDM小鼠造模成功后给予普通饲料饲养4周，分离20只EKODM小鼠腹腔内白色脂肪组织分别以块状移植至10只WTDM小鼠、10只WT小鼠背部，受体鼠术后饲养8周。于术前、术后4周、术后8周监测受体小鼠生命体征及空腹血糖、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)。于术后8周处死各组小鼠，采集腹部及受体小鼠背部的白色脂肪组织，称重记录。光镜下观察四种小鼠腹部及两种供体脂肪组织术后8周的形态特点及计算脂肪细胞体积；提取并检测各组脂肪组织的TG、TC含量；实时荧光定量PCR法检测各组脂肪组织载脂蛋白E(ApoE)、脂蛋白酯酶(LPL)、激素敏感型酯酶(HSL)、脂肪酸合成酶(FAS)的基因表达水平。
　　结果：
　　1.血糖水平：EKODM及WTDM小鼠血糖较对照EKO及WT小鼠显著升高随时间呈上升趋势(P<0.05)；对照小鼠血糖在实验过程中维持稳定水平(P>0.05)。
　　2.血脂水平：WTDM小鼠的TG水平高于WT组、EKO组、EKODM组小鼠(P<0.05)；EKO及EKODM小鼠TC水平较野生型鼠明显升高(P<0.05)。WT及WTDM组TG、TC水平在脂肪移植前后无明显差异(P>0.05)。
　　3.脂肪细胞形态：术后8w，EKODM鼠白色脂肪组织作为供体移植至WT鼠(EKODM→WT组)及WTDM鼠(EKODM→WTDM组)的脂肪细胞的平均横截面积较EKODM鼠明显增大(P<0.05)，EKODM→WT组增大较明显。
　　4.脂肪组织TG及TC含量：EKO及WTDM鼠脂肪组织TG含量较WT组明显降低(P<0.05)，EKODM→WT组TG含量较EKODM→WTDM组有升高趋势；EKO鼠脂肪组织TC含量显著升高(P<0.05)，两种供体脂肪TC含量无差异。
　　5.脂肪组织ApoE基因表达：EKODM→WT及EKODM→WTDM供体脂肪均显著表达ApoE；WTDM组表达水平明显低于WT组(P<0.05)。
　　6.脂肪组织HSL基因表达：1)EKO小鼠较WT对照鼠HSL表达水平明显降低(P<0.05)；2) WTDM及EKODM小鼠脂肪组织HSL表达均明显受抑；3) EKODM鼠HSL表达较WTDM鼠明显减少(P<0.05)；4) EKODM-WT组较EKODM组HSL表达水平显著升高(P<0.05)，EKODM-WTDM组较EKODM有升高趋势。
　　7.脂肪组织LPL基因表达：1) EKO较WT小鼠脂肪组织LPL表达水平明显降低(P<0.05)；2) WTDM及EKODM小鼠脂肪组织LPL表达明显受抑；3) EKODM-WT组及EKODM-WTDM组较EKODM组LPL表达水平明显升高(P<0.05)。
　　8.脂肪组织FAS基因表达：1) EKODM组FAS表达较EKO、WT、WTDM组均有减少(P<0.05)；2) EKODM-WT组较EKODM组FAS表达水平有所升高(P<0.05)，但EKODM-WTDM组较EKODM组无明显变化(P>0.05)。
　　结论：
　　1.诱导糖尿病可明显减少WT及EKO小鼠脂肪细胞体积；抑制脂肪组织ApoE、HSL、LPL及EKODM鼠FAS的表达，提示糖尿病小鼠脂肪细胞分化障碍。
　　2.EKODM小鼠白色脂肪组织供体移植至WT及WTDM鼠均明显表达ApoE。
　　3.表达ApoE能够促进EKODM脂肪细胞在正常及糖尿病环境下HSL、LPL的表达及正常血糖环境下的FAS表达，明显增大脂肪细胞体积，从而促进脂肪细胞的分化。这些提示脂肪源性ApoE可促进脂肪细胞的分化，即使在糖尿病状态下。

目录

封面

声明

中文摘要

英文摘要

目录

前言

1. 2型糖尿病与血脂

2.载脂蛋白E与血脂的关系

实验材料及方法

1.材料

2.方法

3. 统计学处理：

结果

1 各组小鼠一般状态比较

2 各组小鼠血生化指标比较

3 各组小鼠脂肪组织大体和光镜下的结构变化（HE染色）

4 各组小鼠脂肪组织的TG、TC含量

5各组小鼠脂肪细胞的ApoE、HSL、LPL、FAS的表达

讨论

1.DM小鼠动物模型的建立

2.脂源性ApoE的表达

3.脂源性ApoE对脂肪细胞的生物特性的影响

结论

参考文献

缩略词表

已发表文章

致谢