泰拉霉素对猪多杀性巴氏杆菌的半体内药动/药效同步模型研究

摘要

本研究建立了泰拉霉素在生物样品中的超高效液相色谱串联质谱（UPLC-MS/MS）检测方法；在建立猪组织笼模型的基础上，研究了泰拉霉素在猪体内的药物动力学，考察了泰拉霉素在血清、组织液和炎性渗出液中对多杀性巴氏杆菌的抗菌作用，建立了泰拉霉素对多杀性巴氏杆菌的半体内药动/药效学整合模型（Exvivo PK/PD model）并获得泰拉霉素对多杀性巴氏杆菌的PK/PD同步参数。
　　泰拉霉素在猪血清、组织液及炎性渗出液中浓度测定采用UPLC-MS/MS检测方法。乙腈沉淀蛋白，以罗红霉素为内标物对生物样品的泰拉霉素含量进行分析。泰拉霉素在三种生物样品中的回收率均高于85.0%，批内及批间变异系数均小于10%。检测限为0.5ng/mL，定量限为1.0ng/mL。本方法简单，灵敏，效率高，能够满足药动学研究的需要。
　　参照临床实验室标准化研究所CLSI(2013)的标准，采用微量肉汤法测定了泰拉霉素在肉汤、血清、组织液及炎性渗出液中的最小抑菌浓度（MIC）和最小杀菌浓度（MBC）。研究了泰拉霉素对多杀性巴氏杆菌的防突变浓度及抗菌后效应。结果表明，泰拉霉素对多杀性巴氏杆菌CVCCC430在MH II肉汤中的MIC值和MBC值为0.25μg/mL。在血清、组织液及炎性渗出液中的MIC值均为0.03μg/mL，MBC值均为0.06μg/mL。泰拉霉素对多杀性巴氏杆菌CVCC430的MPCpr的值为2μg/mL，MPC的值为1.6μg/mL。
　　在成功建立组织笼模型的基础上，12头健康猪分别进行静脉注射和肌内注射2.5mg/kg b.w.泰拉霉素，采用UPLC-MS/MS测定血清、组织液及炎性渗出液中泰拉霉素的药物浓度，运用WinNonlin分析软件对药动数据进行处理。结果显示，单剂量静脉注射给药后，猪血清中泰拉霉素的药时数据符合非房室模型，其主要药动学参数：t1/2β为71.326h，AUClast为15.947μg·h/mL，Vd为17.409L/kg；组织液和炎性渗出液中泰拉霉素的Tmax分别为4.500h和8.500h，Cmax分别为0.102μg/mL和0.145μg/mL。单剂量肌内注射给药后，猪血清中泰拉霉素的药时数据符合非房室模型，其主要药动学参数：t1/2β为63.548h，Cmax为0.740μg/mL，Tmax为0.25h，AUClast为16.317μg·mL/h，F为104.27%。组织液和炎性渗出液中泰拉霉素的Tmax分别为21.500h和8.000h，Cmax分别为0.053μg/mL和0.115μg/mL。
　　采用Inhibitory effect sigmoid Emax模型对半体内PK/PD指数与抗菌效应之间的相关性进行拟合，得到血清中达到抑菌效果、杀菌效果和清除细菌的最小的AUC24h/MIC值分别为44.55h、73.19h和92.44h。结合文献报道的猪源的多杀性巴氏杆菌在肉汤中的MIC90，外推即可得到多杀性巴氏杆菌体内MIC90为0.12μg/mL，通过计算得到清除猪血清中多杀性巴氏杆菌所需要的最小的给药剂量为13.25mg/kg b.w.。

目录

声明

英文缩略表

1前言

1.1 泰拉霉素的研究概况

1.2 抗菌药物PK/PD同步模型概况

1.3 研究目的与意义

2.1 材料

2.2 泰拉霉素检测方法

2.3 泰拉霉素对多杀性巴氏杆菌体外抗菌活性

2.4 泰拉霉素对多杀性巴氏杆菌半体内PK/PD同步模型的研究

2.5 数据处理与PK/PD模型的构建

3.1 检测方法的验证

3.2 泰拉霉素对多杀性巴氏杆菌的体外抗菌活性

3.3泰拉霉素在猪体内的药动学特征

3.4 PK/PD模型的建立

4 讨论

4.1 泰拉霉素的检测方法的选择

4.2 泰拉霉素的体外抗菌活性

4.3 泰拉霉素在猪体内的药动学特征

4.4 泰拉霉素对多杀性巴氏杆菌半体内药动/药效模型研究

5 总结

致谢

参考文献