调肝方药加味四逆散色谱指纹图谱的初步建立与分析

摘要

目的：
　　初步建立调肝方药加味四逆散(Jiaweisinisan，JWSNS)的色谱指纹图谱并进行分析。
　　方法：
　　建立标准汤剂煎煮方法，煎取供试品，高效液相色谱法分析十批JWSNS汤剂，建立 JWSNS的高效液相指纹图谱。标准煎煮方法为粉碎并称取石决明30g，取水600ml浸泡石决明，时间30min。先煎石决明，2100w煎3min，改800w煎30min，同时取水400ml浸泡余六味中药30min。计量先煎余液量，补入水量(即670ml-400ml-先煎余液量)与其余水药同石决明共为一煎，煎法同上，一煎药物取汁并计量，取水520ml，入锅开始二煎，2100w煎3min，改800w煎25min。二煎取汁并计量。合并三个电磁炉煎取余液量，趁热过滤并计量，取三分之一份作为供试品原液。高效液相条件：Phenomenex LunaC18(2)(250×4.6mm，5μm)色谱柱，二极管阵列检测器，乙腈-0.1%磷酸流动相梯度洗脱,常规流速1.0 ml/min，230nm紫外检测波长，柱温为30℃。采用国家药典委员会中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件（2004A版）分析十批图谱的共有峰。采用紫外光谱和标准品对照的方法鉴定主要特征峰成分。
　　结果：
　　建立了标准煎煮方法，22次标准煎煮最后余液量总体相对标准偏差（relative standard deviation，RSD）为8%，其中十批全方RSD8%、七个单味RSD9%以及五批全方重复RSD3%。十批JWSNS汤剂高效液相指纹图谱相似度达到0.98以上，峰位归属结果，JWSNS全方的指纹图谱峰位来源，白芍8个特征峰，栀子9个特征峰，枳壳14个特征峰，生地1个特征峰，枸杞1个特征峰，主要特征峰鉴定结果，10号峰为栀子苷，14号峰为芍药苷，18号峰为柚皮苷，19号峰为橙皮苷。
　　结论：
　　RSD为8%的标准汤剂煎煮方法得到供试液，上样后使高效液相指纹图谱建立的方法精度要求达到RSD<3%（《中药注射液指纹图谱研究的技术要求（暂行）》）。JWSNS高效液相指纹图谱的特征峰基本为方中单味成分的加和，未有明显新峰出现，多数峰来源于白芍、枳壳、栀子。

目录

声明

引言

第一部分 文献整理与理论探讨

第一节 加味四逆散抗心理应激损伤的基础研究现状

一、方剂组成及功效

二、基础药理药效学研究

第二节 中药复方研制的现代方法与探讨

第三节 建立高效液相指纹图谱对JWSNS研发的意义

一、JWSNS复方组成药物分析

二、根据单味中药的成分选择复方的分析手段

三、指纹图谱方法对JWSNS物质基础研究的意义

第二部分 实验研究

材料与方法

结果

讨论

第二节 加味四逆散煎剂的高效液相分析方法建立及指纹图谱分析

材料

方法与结果

讨论

第三部分 研究结论

第四部分 存在问题与研究展望

一、存在问题

二、研究展望

参考文献

附录

附录一：主要英文缩略词与中英文对照

附录二：加味四逆散组成中药主要饮片来源

致谢