参芪降糖片质量控制及其HPLC指纹图谱研究

摘要

中药指纹图谱在一定条件下能基本反映所含成分的全貌，较好地体现成分的复杂性和相关性，广泛应用于中药质量评价和控制，比单一成分或指标性成分的质量控制方法，更加具有科学性和全面性。本研究在参芪降糖片现行质量标准的基础上进行质量标准的提高，对其指标成分进行定性鉴别和定量分析，建立HPLC指纹图谱，实现对参芪降糖片更为全面的质量评价，为其临床用药安全提供科学依据。 目的: 提高现行参芪降糖片质量标准;建立参芪降糖片HPLC指纹图谱，为科学地评价其质量提供科学依据。 方法: (1)采用薄层色谱法(TLC)对参芪降糖片方药中的人参茎叶皂苷、黄芪、五味子进行定性鉴别; (2)采用高效液相色谱法(HPLC)测定人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rd和五味子醇甲的含量; (3)采用中药HPLC指纹图谱技术，建立参芪降糖片指纹图谱，对共有指纹峰进行标定;利用对照品对峰的成分进行指认;通过与单味药材图谱对比，确定相关色谱峰的归属。 (4)通过多糖酸水解柱前衍生(PMP)-HPLC法，建立参芪降糖片多糖指纹图谱。 结果: (1)建立了参芪降糖片方药中人参茎叶皂苷、黄芪、五味子的薄层鉴别方法。 (2)参芪降糖片中含量测定方法可行，其中人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rd、五味子醇甲的线性范围分别为0.434～13.007μg(r=0.9999)，1.051～31.520μg(r=0.9999),0.546～16.388μg(r=0.9999),0.054～1.633μg(r=0.9998);平均回收率分别为98.8％(RSD1.02％)，98.7％(RSD0.85％)，98.7％(RSD1.11％)，99.3％(RSD0.88％)。 (3)建立了参芪降糖片HPLC指纹图谱分析方法，10批样品标定了38个共有峰，鉴别了其中10个特征峰，明确了31个共有峰的归属，10批样品相似度在0.90～0.96之间。 (4)建立了参芪降糖片中多糖部分酸水解柱前衍生PMP-HPLC指纹图谱，10批样品标定了6个共有峰，鉴别了6种单糖，样品相似度均在0.98以上，可以作为质量控制和评价指标之一。 结论: (1)本研究所建立的人参茎叶皂苷、黄芪、五味子的薄层色谱鉴别方法简便、准确、可靠、适用性强，可以用于复方的质量控制。 (2)本研究同时测定了参芪降糖片中4种成分含量，该法准确、简便、分离效果好，可以用于参芪降糖片中人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rd、五味子醇甲的含量测定。 (3)所建立的参芪降糖片HPLC指纹图谱及其多糖PMP-HPLC指纹图谱方法具有良好的精密度、重现性、稳定性，各共有峰间分离度良好，为其质量控制提供了较全面的信息，可用于参芪降糖片质量的综合评价。

目录

声明

摘要

引言

第一章 文献研究

1．1 中药复方质量控制的历史和现状

1．2 中药复方质量控制面临的问题

1．3 基于色谱指纹图谱的中药复方质量控制

1．3．1 指纹图谱的概念和特点

1．3．2 色谱指纹图谱在中药复方中的应用

1．4 参芪降糖片研究现状

1．4．1 药理学研究进展

1．4．2 临床应用研究进展

1．4．3 毒理学研究进展

1．4．4 质量控制研究进展

1．4．5 参芪降糖片中主要药味研究进展

1．5 多糖研究概述

1．5．1 多糖的概念及其作用

1．5．2 多糖的提取方法

1．5．3 多糖的测定方法

第二章 参芪降糖片质量标准研究

2．1 性状

2．2 人参茎叶皂苷、黄芪、五味子薄层鉴别

2．2．1 仪器与试药

2．2．2 方法与结果

2．3 人参皂苷Rg1、Re、Rd及五味子醇甲含量测定

2．3．1 仪器与试药

2．3．2 方法与结果

2．4 分析与讨论

第三章 参芪降糖片HPLC指纹图谱研究

3．1 中等极性部位HPLC指纹图谱

3．1．1 仪器与试药

3．1．2 供试品溶液制备方法筛选

3．1．3 色谱条件的筛选

3．1．4 对照品溶液的制备

3．1．5 单味药材溶液的制备

3．1．6 方法学考察

3．1．7 指纹图谱的建立与分析

3．1．8 分析与讨论

3．2 多糖酸水解柱前衍生HPLC指纹图谱

3．2．1 仪器与试药

3．2．2 色谱条件

3．2．3 对照品溶液的制备

3．2．4 供试品溶液制备方法筛选

3．2．5 方法学考察

3．2．6 指纹图谱的建立与分析

3．2．7 分析与讨论

第四章 结语

4．1 实验总结

4．2 问题与展望

参考文献

在校期间发表论文及参与课题情况

致谢