人参总皂苷抑制血管紧张素Ⅱ所致乳鼠心肌细胞肥大

摘要

目的：观察人参总皂苷(total ginsenosides，TG)对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ，AngⅡ)所致乳鼠心肌细胞肥大的影响并探讨其可能的机制。 方法：成功体外培养SD乳鼠心肌细胞3天后，根据实验需要随机分成正常组、模型组、阳性对照药精氨酸(L-arg 10-3 mol·L-1)组、TG高剂量(200μg·ml-1)组、TG中剂量(100μg·ml-1)组和TG低剂量(5μg·ml-1)组；同时，另设一组：在正常细胞中加入高剂量TG以观察有无非特异性干扰；此外，为探讨TG的作用与NO释放的关系，还设TG 200μg·ml-1+NO合酶抑制剂L-NAME 10-3 mol·L-1组和L-arg 10-3 mol·L-1+L-NAME 10-3 mol·L-1组。除正常组和正常细胞+高剂量TG组外，其余各组均加入10-7mol·L-1的AngⅡ以诱导心肌细胞肥大。继续培养2天后，以MTT法检测细胞的活性；HE染色观察细胞肥大情况并用B12000图像分析系统测量细胞直径；采用Bradford蛋白浓度测定试剂盒检测蛋白含量；Realtime RT-PCR方法检测心肌细胞心房利钠因子(ANF)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、钙调神经磷酸酶(CaN)、细胞外信号调节激酶1(ERK1)和原癌基因c-myc等mRNA的表达；Western blotting方法检测心肌细胞钙调神经磷酸酶a-亚基(CnA)和丝裂素活化蛋白激酶磷酸酶-1(MKP-1)蛋白质的表达。 结果：10-7 mol·L-1 AngⅡ具有明显的促心肌细胞肥大作用，使心肌细胞肿胀、体积增大、细胞直径加宽、蛋白含量增加，并使c-myc和ANFmRNA表达明显上调，表明心肌细胞肥大。AngⅡ还使CaN和ERK1 mRNA表达增强，CnA蛋白表达升高。与模型组比较，TG低、中、高剂量和L-arg预防给药能明显改善心肌细胞肥大的各指标(包括ANFmRNA表达)，并使CaN、ERK1mRNA和CnA蛋白表达明显降低(P＜0.05)；TG还能升高MKP-1蛋白质的表达。L-NAME能阻抑Larg对上述心肌细胞肥大指标的影响，而同量的L-NAME并不明显影响TG高剂量对上述指标的作用，虽然TG中、高剂量组能轻度提高eNOSmRNA的表达。 结论：1．TG对AngⅡ诱导的体外培养心肌细胞肥大有明显抑制作用；2．TG对心肌细胞肥大的抑制作用可能与其抑制CaN和ERK信号转导通路有关；3．TG的抗心肌细胞肥大作用并不主要依赖NO释放。

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心肌肥大的分子机制及其研究进展

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