三种药用植物中乙酰胆碱酯酶抑制活性成分的研究

摘要

阿尔茨海默病(Alzheimer's disease，AD)是一种老年性神经退行性疾病，其临床主要表现为进行性记忆减退、语言和行为障碍，是老年期痴呆的主要发病原因。目前，乙酰胆碱酯酶抑制剂(actylcholinesterase inhibitor，AChEI)被认为是治疗AD最有效的药物。天然植物药用成分具有疗效好，副作用小，作用面广，适宜长期服用等优点。因而，本课题对三种药用植物中AChE抑制活性成分进行了研究。主要的内容和结果如下：
　　 1．钩藤中AChE抑制活性成分的研究
　　 通过活性跟踪的方法从钩藤(Uncaria rhynchophylla(Miq.)Jacks.)中分离并鉴定出7个化合物，它们分别鉴定为geissoschizine methyl ether(1)，vallesiachotamine(2)，hisuteine(3)，毛钩藤碱(4)，异钩藤碱(5)，异去氢钩藤碱(6)和去氢钩藤碱(7)。用改进的Ellman法测定了它们的抗AChE活性。实验结果表明，化合物1为一种活性较好的天然AChEI，其IC50值为10μM。动力学研究表明化合物1是AChE的可逆非竞争性抑制剂。三维分子模拟实验表明，它的羰基和AChE的Tyr-72的羟基形成一条氢键，从而对AChE形成抑制。
　　 2．平贝母中AChE抑制活性成分的研究
　　 通过活性跟踪的方法从平贝母(Fritillaria ussuriensis Maxim)中分离并鉴定出6个化合物，它们分别鉴定为乌苏里啶(8)，Benzo[7，8]fluoreno[2，1-b]quinolizinecevane-3，6，16，20-tetrol(9)，去氢鄂贝啶碱(10)，平贝母酮A(11)，平贝母碱丙(12)和贝母素甲(13)，其中化合物11为新化合物。用改进的Ellman法测定了它们的抗AChE活性。实验结果表明，这些化合物的活性都比较弱。
　　 3．止泻木中AChE抑制活性成分的研究
　　 通过活性跟踪的方法从止泻木(Holarrhena antidysenterica)中分离并鉴定出5个化合物，它们分别鉴定为锥丝碱(14)，异锥丝明(15)，锥丝明(16)，conarrhimin(17)和锥丝亚胺(18)。用改进的Ellman法测定了它们的抗AChE活性。实验结果表明化合物14、16、17和18为活性较好的天然AChEI，它们的IC50值分别为21μM、4μM、28μM、23μM。分子对接实验表明，化合物16和14在活性位点的结合采取同一种结合构象；化合物18和17在活性位点的结合也采取同一种结合构象；这两种结合模式下化合物16、14、18、17都处于疏水性的口袋之中；化合物15在分子对接中获得的结合模式是不合理的，即不能在活性位点结合，与改进的Ellman法测定结果是一致的。最后，对活性最好的化合物16作了动力学研究，结果表明，化合物16是AChE的可逆非竞争性抑制剂。
　　 本论文得到的5种活性较好的化合物对AChE的抑制活性为首次报道，它们可作为治疗AD的先导化合物，并通过进一步的结构改造与修饰，有望开发出治疗AD的新药。

目录

文摘

英文文摘

第1章 绪论

1.1 引言

1.2 AD的发病机理及主要的病理特征

1.3 乙酰胆胆碱抑制剂

1.3.1 他克林及其类似物

1.3.2 氨基甲酸酯类

1.3.3 生物碱类

1.3.4 苄基哌啶类

1.3.5 其它

1.3.6 小结

1.4 本课题的研究目的和意义

1.5 本论文分离得到的化合物结构式

第2章 钩藤抗乙酰胆碱酯酶活性成分研究

2.1 前言

2.2 钩藤总生物碱的活性测试

2.2.1 植物来源及鉴定

2.2.2 仪器与试剂

2.2.3 实验方法

2.2.4 结果与讨论

2.3 钩藤总生物碱的活性成分研究

2.3.1 仪器与试剂

2.3.2 实验方法

2.3.3 结果与讨论

2.4 小结

第3章 平贝母抗乙酰胆碱酯酶活性成分研究

3.1 引言

3.2 平贝母总生物碱的活性测试

3.2.1 植物来源及鉴定

3.2.2 仪器和试剂

3.2.3 实验方法

3.2.4 结果与讨论

3.3 平贝母总生物碱活性成分研究

3.3.1 仪器与试剂

3.3.2 实验方法

3.3.3 结果与讨论

3.4 小结

第4章 止泻木抗乙酰胆碱酯酶活性成分研究

4.1 引言

4.2 止泻木总生物碱的活性测试

4.2.1 植物来源及鉴定

4.2.2 仪器与试剂

4.2.3 实验方法

4.2.4 结果与讨论

4.3 止泻木总生物碱的活性成分研究

4.3.1 仪器与试剂

4.3.2 实验方法

4.3.3 结果与讨论

4.4 小结

结论

参考文献

致谢

附录A （攻读硕士学位期间所发表的论文）

附录B 新化合物和活性化合物的部分谱图