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双室共培养中人羊膜上皮细胞诱导分化为腺泡细胞研究

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前言

实验一:SD大鼠下颌下腺细胞及人羊膜上皮细胞的分离和双室诱导分化培养

材料与方法

结果

讨论

参考文献

实验二:诱导前后细胞的表面标记鉴定及荧光实时定量RT—PC检测

材料与方法

结果

讨论

参考文献

实验三:人羊膜上皮细胞植入SD大鼠损伤下颌下腺后的原位观察

材料与方法

结果

讨论

参考文献

全文总结

综述 唾液腺组织工程种子细胞研究进展

参考文献

致谢

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摘要

[目的]通过人羊膜上皮细胞(hAECs)体外诱导分化为腺泡细胞及人羊膜上皮细胞移植到受损伤唾液腺组织后的存活情况研究,为唾液腺功能障碍性疾病的细胞替代治疗寻找理想的干细胞来源。
   [方法]①采用机械法和酶消化法从人羊膜组织中分离hAECs,经原代培养后用流式细胞仪(FCM)和免疫细胞化学方法进行表型鉴定。②hAECs与SD大鼠唾液腺细胞用双室装置进行共培养。③取诱导1周、2周后的hAECs,用免疫细胞化学、荧光实时定量RT-PCR等方法检测α-淀粉酶及其mRNA的表达。④将BrdU标记的hAECs悬液注入SD大鼠损伤下颌下腺组织内。
   [结果]①胰蛋白酶消化法能有效从人羊膜中分离hAECs,检测结果显示hAECs表达CD29和CK19阳性;CD44和α-淀粉酶弱阳性。②在诱导后2周内,hAECs中α-淀粉酶mRNA的表达量随时间延长而增加。③免疫组化结果显示,细胞移植后第4、7、14天组织切片均可见BrdU染色阳性细胞。
   [结论]hAECs具有向唾液腺样细胞分化的能力,通过进一步研究,可望成为唾液腺功能障碍性疾病细胞替代治疗的干细胞来源。

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