液氮冷冻兔股骨头坏死模型制备新方法及可靠性评价

摘要

目的：建立一种可靠的、贴近已知人类股骨头坏死病理演变规律的新液氮冷冻法兔股骨头坏死动物模型。
　　 方法：采用成年新西兰大白兔21只，无菌条件下手术层层分离臀肌，切断股骨头圆韧带，显露股骨头。用医用棉签蘸取液氮，对股骨头软骨面负重区进行3次冷冻3次复温制备兔双侧股骨头坏死模型。于制模后3、7 d及2、4、6、8周随机选择模型兔，进行X线摄片，随即手术取下股骨头，进行股骨头大体形态观察，之后常规石蜡包埋、切片，经HE染色后进行组织病理切片肉眼及光镜观察。
　　 结果：X线摄片结果显示，制模3、7 d股骨头无明显异常改变；制模2周时股骨头密度增高；4周时股骨头出现密度不均影像；至6周时股骨头外形不规则，边缘有透亮区并开始塌陷；8周时，股骨头塌陷明显，关节间隙增大，骺板模糊。股骨头大体形态观察发现随时间推移，股骨头受损程度呈加重演变特点。组织病理切片观察，制模3 d股骨头组织切片可见软骨细胞和骨细胞坏死；7 d坏死的空骨陷窝增多；2周见关节软骨缺损，软骨下区域小血管充血，骨小梁开始断裂、排列紊乱；4周见关节软骨剥脱，髓腔内脂肪细胞坏死，并出现增生的纤维组织；6周时见股骨头塌陷，并出现纤维化骨的匍行附着；8周出现新骨沉积性生长，骺板细胞被挤压、变形。
　　 结论：本文建立的液氮冷冻兔股骨头坏死模型新方法具有创伤性小、贴近人股骨头坏死病理演变规律的优点，为干细胞移植等治疗研究提供了一种理想的模型制备策略。