高盐饮食对Wistar大鼠血压和左室重构的影响及替米沙坦和辣椒素干预作用

摘要

目的:探讨TGF-β1/Smads信号通路和RAS在高盐致Wistar大鼠高血压及左室重构中的作用;评价替米沙坦和辣椒素对高盐致Wistar大鼠高血压及左室重构模型的疗效，并初探其机制。
　　 方法:Wistar雄性大鼠135只，随机分为对照组（给予0.5％NaCl的颗粒饲料，NSD组），4％高盐组（给予4％ NaCl的颗粒饲料，4HSD组），8％高盐组（给予8％ NaCl的颗粒饲料，8HSD组），4％高盐+替米沙坦组（给予4％ NaCl的颗粒饲料+替米沙坦，4HSD+ARB组），8％高盐+替米沙坦组（给予8％ NaCl的颗粒饲料+替米沙坦，8HSD+ARB组），4％高盐+辣椒素组（给予4％ NaCl的颗粒饲料+辣椒素，4HSD+CAP组），8％高盐+辣椒素组（给予8％ NaCl的颗粒饲料+辣椒素，8HSD+CAP组），每两周测定尾动脉压一次，喂养24周。实验结束后，根据尾动脉压再将高盐组分为4％高盐高血压组(4HSD-H组)、8％高盐高血压组（8HSD-H组）和4％高盐正常血压组（4HSD-N组）、8％高盐正常血压组（8HSD-N组）。各组大鼠取出左心室，称重并计算左室重量指数(LVMI)，HE染色测量左室心肌细胞直径(CMD)，Masson染色测量心肌间质、心肌内血管周围及血管壁的纤维化程度;运用real time RT-PCR检测左心室TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad7、AT1、AT2、ACE1及ACE2的mRNA表达，同时采用免疫印迹法检测左心室α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、PCNA、TGF-β1、磷酸化Smad2/3(p-Smad2/3)、Smad7、AT1及AT2蛋白的表达。
　　 结果:4％高盐高血压组、8％高盐高血压组血压高于其他各组(P＜0.05)。与对照组相比，4％高盐组和8％高盐组左室重量指数、心肌细胞直径及左室间质、心肌内血管周围及血管壁的胶原容积分数(CVF)增加(P＜0.05)，TGF-β1、Smad2、Smad3、AT1的mRNA表达及AT1/AT2、ACE1/ACE2的mRNA比值明显增加(P＜0.05)，α-SMA、PCNA、TGF-β1的蛋白表达量及AT1/AT2的蛋白比值明显增加(P＜0.05)，而Smad7的表达明显减少（P＜0.05）;4％高盐高血压组和8％高盐高血压组AT2、ACE1、ACE2的mRNA表达及p-Smad2/3、AT1、AT2的蛋白表达量明显增加（P＜0.05）;经替米沙坦干预后，左室重量指数、心肌细胞直径及左室间质、心肌内血管周围及血管壁的胶原容积分数(CVF)明显减少(P＜0.05); TGF-β1、Smad2、Smad3、AT1、ACE1、ACE2的mRNA表达及AT1/AT2及ACE1/ACE2的mRNA比值明显降低（P＜0.05），α-SMA、PCNA、TGF-β1、p-Smad2/3、AT1的蛋白表达量及AT1/AT2的蛋白比值明显降低(P＜0.05），而Smad7的表达明显增加(P＜0.05）。经辣椒素干预后，左室重量指数、心肌细胞直径及左室间质、心肌内血管周围及血管壁的胶原容积分数(CVF)明显减少(P＜0.05）;TGF-β1、Smad2、Smad3、AT1、ACE1、ACE2的mRNA表达及AT1/AT2及ACE1/ACE2的mRNA比值明显降低(P＜0.05)，α-SMA、PCNA、TGF-β1、p-Smad2/3、AT1的蛋白表达量及AT1/AT2的蛋白比值明显降低（P＜0.05），而Smad7的表达明显增加（P＜0.05）。
　　 结论:(1)高盐饮食能使部分Wistar大鼠血压升高;(2)高盐能够独立于血压之外直接诱导左室重构;(3)TGF-β1/Smads信号通路和RAS可能参与了由高盐导致的高血压及左室重构的发生机制。(4)替米沙坦通过干预TGF-β1/Smads信号通路和RAS的表达、抑制高盐诱导的高血压及左室心肌肥大与纤维化的作用。(5)辣椒素能减轻高盐致高血压及左室心肌肥大与纤维化的效应，其机制可能与干预TGF-β1/Smads信号通路和RAS的表达有关。

目录

声明

英文缩略词表

摘要

前言

1 材料

1．1 实验材料

1．2 主要试验试剂及试剂的配置

1．3．主要实验仪器

2 实验方法

2．1 建立模型及分组

2．2 体重的测定及给药方法

2．3 尾动脉间接测压

2．4 颈动脉直接测压

2．5 取材

2．6 HE、Masson病理切片制作及图像分析

2．7 总RNA的提取和各指标real time RT-PCR的反应条件

2．8 总蛋白提取和各指标的蛋白表达定量

2．9 统计学处理

3 结果

3．1 高血压模型的建立

3．2 病理结果

3．3 大鼠左心室各指标基因转录结果

3．4 大鼠左心室各指标的蛋白表达结果

4 讨论

4．1 高盐饮食致wistar大鼠高血压及左室重构模型的建立

4．2 TGF-β1／Smads信号通路在高盐致Wistar大鼠高血压及左室重构的作用

4．2 RAS在高盐致Wistar大鼠高血压及左室重构的作用

4．3 替米沙坦对高盐致Wistar大鼠高血压及左心室重构的治疗作用

4．4 辣椒素对高盐致Wistar大鼠高血压及左心室重构的治疗作用

5 结论

参考文献

综述

致谢

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