革兰阴性杆菌耐药性及其产ESBLs基因型的研究

摘要

目的：调查兰州大学第二医院医院感染革兰阴性杆菌谱及其耐药性，对经确认的产超广谱β-内酰胺酶(Extended-spectrumbeta-lactamases，ESBLs)菌株进行耐药基因分型。 方法：采用MicroScan-4和K-B法，对兰州大学第二医院2000年-2004年的院内感染革兰阴性杆菌进行鉴定和药物敏感试验，检测分离菌对16种抗生素的耐药性，利用“whonet5.3”软件对耐药性结果进行录入及分析。通过表型初筛法(K-B)、表型确认法(K-B)、三维试验确认产ESBLs菌株，采用PCR对ESBLs基因进行分型。 结果：1、兰州大学第二医院革兰阴性杆菌所致医院感染中，大肠埃希菌比例最高，占34％，阴沟肠杆菌、不动杆菌比例呈上升趋势。细菌的耐药率在逐年上升，其中阴沟肠杆菌和鲍曼不动杆菌，耐药性高于其它革兰阴性杆菌(p＜0.05)，对第三代头孢菌素耐药率分别达到60-80％、40-70％，对亚胺培南耐药的菌株日益增多，甚至出现了“全耐药”的鲍曼不动杆菌。敏感性较高的抗生素有丁胺卡那、派拉西林/他唑巴坦、亚胺培南。 2、本院2005年5月～9月从医院感染临床标本分离革兰阴性杆菌175株中，检出产ESBLs菌49株，分布于大肠埃氏希菌、克雷伯菌、阴沟肠杆菌、弗劳地枸椽杆菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌，其中，主要是阴沟肠杆菌(17/49)，其次是大肠埃氏希菌(15/49)。单种菌株产ESBLs率前三位是阴沟肠杆菌(17/30，56.6％)，大肠埃氏希菌(15/40，37.5％)，肺炎克雷伯(6/24，25.0％)。各病区中神经科产ESBLs分离率最高(32.7％)。 3、按照NCCLS/CLSI推荐的表型确证法检测阴沟肠杆菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌等菌的ESBLs与三维法进行比较，其准确率低于50％。 4、本院2005年5月～9月从175株革兰阴性杆菌中分离并确认产ESBLs菌49株，质粒DNA提取后经PCR扩增，产物测序符合TEM、SHV、CTX-M耐药基因型序列。PCR产物聚丙烯酰胺凝胶电泳结果提示，34株出现TEM型阳性条带，5株出现SHV型、16株出现CTX-M型阳性条带，11株无条带。 结论：1、本院院内感染革兰阴性杆菌对临床常用抗生素均有较高的耐药率，耐药性逐年上升。 2、阴沟肠杆菌、大肠埃希菌是主要产ESBLs的革兰阴性杆菌。神经科是主要产ESBLs菌的病区。 3、临床微生物实验室采用三维法测定阴沟肠杆菌、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌ESBLs更准确。 4、兰州大学第二医院产ESBLs菌株耐药基因以TEM型、CTX-M型为主。

目录

文摘

英文文摘

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详细前言

第一部分 医院感染革兰阴性杆菌耐药性趋势的研究

第二部分 产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)革兰阴性杆菌的筛选

第三部分 产超广谱酶β-内酰胺(ESBLs)革兰阴性杆菌基因分型

结语

参考文献

攻读学位期间发表论文目录

致谢

附图

缩略词