单一AOT微乳液与AOT/TritonX-100混合微乳液体系中假丝酵母脂肪酶催化蓖麻油水解的研究

摘要

本论文用紫外-可见分光光度计，通过测定蓖麻油的水解产物-脂肪酸与铜离子形成的络合物在710 nm处的吸光度变化，研究了AOT/TritonX-100混合微乳液体系和单一的AOT微乳液体系中，TritonX-100占总表面活性剂的摩尔分数(x(﹪))、水与总体表面活性剂的摩尔比((ω<,0>)、水相pH值、反应温度(T)、酶浓度([E]<,wp>4-24 mg·mL<'-1>)、底物浓度([s]0.04-0.32 mol·L<'-1>)等因素对假丝酵母脂肪酶催化蓖麻油水解反应的影响。研究发现，保持总体表面活性剂浓度不变，向AOT微乳液体系中引入非离子型表面活性剂TritonX-100能够明显提高假丝酵母脂肪酶的酶活性，且在0≤x≤20﹪的范围内，酶活性随着x的增大而迅速增大。研究结果表明，单一AOT微乳液体系中，当反应温度为307.15-311.15 K、水相pH=6.8、ω<,0>=6.7时酶活力最高；而AOT/TritonX-100混合微乳液体系(x=20﹪)中，当反应温度为307.15 K，水相pH=7.0，ω<,0>=5-6时酶活力最高。 应用Arrhenius方程求得了两个体系中该反应的活化能，根据米氏方程求得了表观米氏常数(K<,m,a>)，最大反应速率(v<,max>)以及酶的催化常数(K<,cat>)。发现向AOT微乳液体系中引入非离子型表面活性剂TritonX-100，并不改变反应活化能；但是在AOT/TritonX-100混合微乳液体系中v<,max>和K<,cat>均为单一AOT微乳液体系中的两倍，而K<,m>则略有增大。并对酶在两种不同体系中的稳定性进行了讨论。

目录

声明

摘要

第一章前言

1.1表面活性剂

1.1.1表面活性剂的定义

1.1.2表面活性剂的结构特点

1.1.3表面活性剂的分类及用途

1.1.4表面活性剂的HLB值

1.1.5本实验所用表面活性剂

1.2微乳液

1.2.1微乳液的分类

1.2.2微乳液的性质

1.2.3微乳液的形成

1.2.4 W/O型微乳液中水的性质

1.3 W/O微乳液中的酶及其催化反应

1.3.1 W/O微乳液中酶的增溶

1.3.2 W/O微乳液中酶的增溶机理

1.3.3 W/O微乳液体系中酶分子的构象

1.3.4微乳液中脂肪酶的催化反应分类

1.3.5影响微乳液中酶催化的因素

1.3.6微乳液中酶的稳定性

1.3.7微乳液中酶催化动力学

1.3.8米氏方程的推导及米氏常数的求法

1.3.9含酶微乳液的应用

1.4选题思想及意义

1.4.1研究体系的确定

1.4.2本论文的工作内容

第二章实验部分

2.1实验仪器和试剂

2.1.1实验仪器

2.1.2实验试剂

2.2实验原理

2.3实验方法

2.3.1溶液的配制

2.3.2实验过程

2.4W/O微乳液中假丝酵母脂肪酶热稳定性的测定

第三章实验结果与讨论

3.1标准曲线的测定

3.2反应进程曲线的测定

3.3 TritionX-100含量对酶活性的影响

3.4温度对酶活性的影响及反应的活化能

3.5ω0对酶活性的影响

3.6水相pH值的影响

3.7水池中酶浓度对酶活性的影响

3.8体系中底物浓度对酶活性的影响

3.9酶的稳定性

3.10结论

参考文献

附录

致谢