氯胺酮对体外循环下先心病患者心肌热休克蛋白72mRNA表达的影响

摘要

目的：观察体外循环 (cardiopulmonary bypass，CPB) 期间，先心病患者心肌缺血/再灌注 (ischemia/reperfusion，I/R)时诱导型一氧化氮合酶 (induced nitric oxide synthase，iNOS) mRNA和热休克蛋白 (heat shock protein．HSP) 72mRNA表达的变化，及不同剂量的氯胺酮预处理对它们表达的影响，探讨氯胺酮心肌保护的机制。 方法：拟行房间隔和/或室间隔缺损修补术患者36人，随机分为3组(各12人)：对照组(C组)和氯胺酮干预组(K<,1>组、K<,2>组)。在劈胸骨时、主动脉插管时和主动脉开放前5min，干预组分别静脉注射氯胺酮0.5mg·kg<'-1>和1.0mg·kg<'-1>，对照组注射等量生理盐水。于上腔静脉插管时(T<,1>)、主动脉阻断后30min(T<,2>)和主动脉开放后30min(T<,3>)取适量心肌组织，应用一步法实时荧光定量RT-PCR技术(采用SYBR Green 1嵌合荧光法)，检测心肌中iNOSmRNA和HSP72mRNA的表达量。并分别于T<,1>、T<,2>、T<,3>和主动脉开放后2h(T<,4>)取上腔静脉血4ml，检测血清中肌酸激酶(CK)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)含量。 结果：1．一般资料的比较：三组患者的年龄、性别、体重、手术类型、术前体温、体外循环时间和主动脉阻断时间等差异均无统计学意义(P>0.05)。 2．心肌iNOSmRNA表达的变化：iNOSmRNA的表达量，组内比较，三组在心肌缺血后(T<,2>)和再灌注后(T<,3>)均较缺血前(T<,1>)显著升高(P<0.01)，再灌注后(T<,3>)较缺血后(T<,2>)显著升高(P<0.01)；组问比较，在心肌缺血后(T<,2>)和再灌注后(T<,3>)，氯胺酮干预组均显著低于对照组(P<0.05)，并且K<,2>组较K<,1>组显著降低 (P<0.05)。 3．心肌HSP72mRNA表达的变化：HSP72mRNA表达量，组内比较，三组患者在心肌缺血后(T<,2>)和再灌注后(T<,3>)均显著高于缺血前(T<,1>)(P<0.05)，再灌注后(T<,3>)显著高于缺血后(T<,2>)(P<0.05)；组间比较，在心肌缺血后(T<,2>)和再灌注后(T<,3>)，氯胺酮干预组均显著高于对照组(P<0.05)，K<,1>与K<,2>组相比较差异无显著性(P>0.05)。 4．血清心肌酶的变化：血清心肌酶含量，组内比较，T<,2>、T<,3>、T<,4>与T<,1>比较，p<0.01；T<,3>、T<,4>与T<,2>比较， P<0.01；T<,4>与T<,3>比较， P<0.01。组间比较，三组患者在T<,1>时间点差别无显著性(P>0.05)，在T<,2>、T<,3>、T<,4>时间点K<,1>、K<,2>与C比较，P<0.05，K<,1>与K<,2>比较差别无显著性(P>0.05)。 结论：体外循环触发了心肌的缺血再灌注损伤，iNOS和HSP72参与了心肌缺血再灌注损伤的发生和发展。麻醉和亚麻醉剂量的氯胺酮通过下调心肌iNOSmRNA的表达和上调心肌HSP72mRNA的表达，减少血清心肌酶的漏出，在一定程度上具有心肌保护作用。

目录

文摘

英文文摘

声明

前言

背景回顾

1缺血再灌注损伤损伤的发生

2氯胺酮

3氯胺酮与缺血再灌注损伤损伤

3.1氯胺酮抑制促炎性细胞因子的释放

3.2氯胺酮抑制中性粒细胞(PMN)激活、粘附、呼吸爆发等活性

3.3氯胺酮抑制I/R过程中细胞内钙超载

4氯胺酮对心肌的影响

5结语

材料与方法

1研究对象

1.1病例与分组

1.2麻醉与监测

2标本采集和指标测定

3主要试剂与仪器

3.1主要试剂

3.2实验仪器

4实验方法与步骤

4.1引物设计

4.2 RNA的提取

4.3 RT-PCR扩增及产物分析

4.4标准曲线的制作

4.5一步法实时荧光定量RT-PCR

5统计学处理

结果

讨论

1体外循环与心肌缺血再灌注损伤

2热休克蛋白72在心肌缺血再灌注期间的产生及保护机制

3诱导型一氧化氮合酶与热休克蛋白72

4氯胺酮与心肌保护

结论

参考文献

攻读硕士学位期间论文发表目录

致谢

附录

缩略词