婴儿型双歧杆菌防治小鼠过敏性哮喘及食物过敏的实验研究

摘要

第一部分婴儿型双歧杆菌防治小鼠过敏性哮喘的实验研究
　　目的：研究婴儿型双歧杆菌（Bifidobacterium infantis，B.infantis）对过敏性哮喘的防治作用及相关免疫机制。
　　方法：将40只BALB/c雄性小鼠随机分为4组：正常对照组、过敏性哮喘组、婴儿型双歧杆菌预防组和婴儿型双歧杆菌治疗组。过敏性哮喘组、预防组和治疗组在第7和14天腹腔注射卵清蛋白(ovalbumin，OVA)致敏，第22至28天以1％OVA雾化激发建立哮喘模型，建模同时预防组第0至14天灌胃婴儿型双歧杆菌，治疗组第15至28天灌胃婴儿型双歧杆菌。实验结束后，收集血清和肺泡灌洗液（Bronchoalveolar Lavage Fluid，BALF），完成BALF细胞计数和肺组织HE染色，ELISA法检测OVA特异性IgE、IgG1、IFN-γ、IL-4、IL-5、IL-13和IL-10的水平。
　　结果：（1）过敏症状：过敏性哮喘组小鼠激发后出现打喷嚏、烦躁不安、食欲下降等症状，预防组和治疗组雾化激发后症状较轻。（2）肺泡灌洗液细胞计数：与过敏性哮喘组比较，婴儿型双歧杆菌的预防组和治疗组明显减少。（3）肺组织HE染色：过敏性哮喘组小支气管、肺泡内都有大量的炎性细胞浸润；预防组和治疗组肺组织炎性细胞浸润明显减轻。（4）血清OVA特异性抗体水平：过敏性哮喘组OVA特异性IgG1和IgE显著升高；预防组和治疗组OVA特异性IgG1和IgE均明显降低。（5）细胞因子水平：过敏性哮喘组肺泡灌洗液中IL-13和IL-4水平明显高于正常对照组，血清IL-10明显低于正常对照组，预防组和治疗组较过敏性哮喘组均明显降低（P<0.05），过敏性哮喘组治疗组明显高于过敏性哮喘组，差异显著（P<0.05）。
　　结论：（1）OVA过敏性哮喘组小鼠Th2细胞因子IL-4、IL-13增多，Treg细胞因子IL-10减少，发生Th2/Treg免疫反应失衡的过敏反应。（2）婴儿型双歧杆菌可以改善过敏症状，减轻过敏小鼠的气道炎症，降低OVA特异性抗体IgE和IgG1水平，其机制可能是通过抑制Th2细胞因子IL-4和IL-13的分泌，促进Treg细胞因子IL-10的分泌来调节机体的免疫平衡。
　　第二部分婴儿型双歧杆菌防治小鼠食物过敏的实验研究
　　目的：研究婴儿型双歧杆菌（Bifidobacterium infantis，B.infantis）对食物过敏的防治作用及相关免疫机制。
　　方法：将40只BALB/c雄性小鼠称重，根据体重排序标号，分为四组：正常对照组、食物过敏组、婴儿型双歧杆菌预防组和婴儿双歧杆菌治疗组。食物过敏组、预防组和治疗组于第7、14和21天灌胃β-乳球蛋白（Beta-Lactoglobulin，BLG）致敏，第28天灌胃BLG激发1次。建模同时，预防组第1至21天灌胃婴儿型双歧杆菌，治疗组第22至28天灌胃婴儿型双歧杆菌。实验结束后计算增重结果，取小鼠空肠行HE染色，ELISA法检测总IgE、IFN-γ、IL-4、IL-5、IL-13和IL-10的水平。
　　结果：（1）小鼠症状：BLG致敏及激发后，食物过敏组出现食欲减退、体重减轻、毛发失去光泽；预防组和治疗组小鼠过敏症状不明显。（2）增重情况：食物过敏组小鼠体重减轻，预防组和治疗组体重增加，且治疗组高于预防组。（3）空肠病理HE染色：食物过敏组空肠上皮下出现严重炎症细胞浸润，肠粘膜上皮脱落；预防组和治疗组炎症细胞浸润程度减轻。（4）血清总IgE水平：食物过敏组明显升高，预防组和治疗组较食物过敏组明显降低，治疗组低于预防组。（5）细胞因子水平：食物过敏组IL-4和IL-13水平均明显升高，预防组IL-4和IL-13明显降低，治疗组IL-13水平降低；食物过敏组IL-10水平降低，预防组、治疗组和食物过敏组比较差异不显著。
　　结论：（1）BLG食物过敏小鼠Th2细胞因子IL-4、IL-13增多，Treg细胞因子IL-10减少，发生 Th2/Treg免疫反应失衡的过敏反应。（2）婴儿型双歧杆菌可以降低血清总IgE水平，减轻食物过敏小鼠空肠炎性浸润的程度，维持肠粘膜结构正常，其机制可能是通过抑制Th2细胞因子IL-4和IL-13的分泌来调节免疫平衡，而对调节性T细胞相关细胞因子IL-10作用不明显。

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前言

第一部分 婴儿型双歧杆菌防治小鼠过敏性哮喘的实验研究

1材料与方法

2结果

3讨论

4结论

第二部分 婴儿型双歧杆菌防治小鼠食物过敏的实验研究

1材料与方法

2结果

3讨论

4结论

全文小结

参考文献

综述： 益生菌防治气道过敏的实验研究进展

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