双歧杆菌完整肽聚糖治疗食物过敏小鼠及对调节性T细胞影响的研究

摘要

目的:以食物过敏小鼠为动物模型,通过灌喂双歧杆菌完整肽聚糖(Whole Peptidoglycan,WPG),观察其对食物过敏的治疗效果以及对调节性T细胞的作用;探讨双歧杆菌防治变态反应性疾病的可能机制,为益生菌及其生物活性成分的进一步开发利用提供依据。
　　 方法:对象:无鸡蛋喂养4～6周龄sPF级Balb/c雌鼠24只,随机分为3组,每组8只。取其中2组建立食物过敏模型,分别为:OVA致敏阳性对照组(OVA组)和OVA激发后灌喂双歧杆菌WPG治疗组(T组);同时设正常生理盐水阴性对照组(C组)。方法:(1)观察各组症状表现;(2)HE染色观察各组小肠组织形态学变化;(3)ELISA法检测血清中OVA特异性IgE水平;(4)流式细胞术分析脾脏单个核细胞悬液中CD4+CD25+调节性T细胞的数量变化;(5)ELISA法检测血清中IL-10和TGF-β水平。
　　 结果:(1)双歧杆菌WPG对OVA介导的速发型变态反应有缓解作用,T组仅12.5％(1/8)的小鼠出现腹泻且腹泻程度较OVA组明显减轻,而OVA组小鼠87.5%(7/8)出现腹泻;T组小鼠平均体重增长高于OVA组(P＜0.05),HE染色可见小肠绒毛中上皮细胞局灶性坏死、脱落、固有层炎症细胞浸润现象明显改善,OVA特异性IgE水平明显降低,差异有显著性(P＜0.05);(2)OVA组与C组相比,小鼠脾脏单个核细胞悬液中Foxp3阳性细胞(Foxp3+CD4+CD25+调节性T细胞)占CD4+CD25+T细胞含量显著降低(P＜0.01),血清IL-10和TGF-β水平皆降低,差异皆有统计学意义(P＜0.05);(3)T组小鼠脾脏单个核细胞悬液中CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞含量高于OVA组,差异有统计学差异(P＜0.05),较C组正常小鼠差异无统计学意义(P＞0.05);T组小鼠脾细胞中Foxp3阳性细胞(Foxp3+CD4+CD25+调节性T细胞)占CD4+CD25+T细胞含量与OVA组相比显著增高(P＜0.01)。T组小鼠血清IL-10水平高于OVA组(P＜0.05);TGF-β水平显著高于OVA组(P＜0.01)。
　　 结论:(1)双歧杆菌WPG与双歧杆菌全菌一样,对OVA致敏小鼠具有相同的治疗作用:可以缓解小鼠急性发作症状,降低食物过敏发病率,减轻肠道炎症病理改变;(2)双歧杆菌WPG在治疗食物过敏中增加CD4+CD25+调节性T细胞数量,刺激细胞因子IL-10和TGF-β分泌,调节Th1/Th2平衡。可能是双歧杆菌防治食物过敏的机制之一。