多位点修饰内吗啡肽及其类似物的构效关系研究

摘要

阿片样肽是最早在神经系统中被确认的神经肽类物质，类阿片及阿片受体广泛分布于哺乳动物的中枢神经系统和外周组织。植物性阿片制剂吗啡在临床上应用于缓解急性疼痛，但是吗啡在产生镇痛作用的同时也伴随着许多的副作用，如呼吸抑制、便秘、心率过缓、血压降低以及容易成瘾产生耐受等，μ-阿片受体系统是寻找新型镇痛药物的重要靶点，内吗啡肽-1和2是对μ-阿片受体具有高亲和性和选择性的内源性阿片肽激动剂，它们同吗啡一样在较低剂量时对急性疼痛有很强的镇痛作用，同时在镇痛剂量条件下缺少部分吗啡样副作用，这就使得内吗啡肽取代吗啡成为新型镇痛药物成为可能，然而内吗啡肽镇痛作用持续时间短，体内快速被酶降解(氨肽酶及二肽基肽酶Ⅳ)，通过血脑屏障到达中枢的能力差以及口服无效等缺点也大大限制了其在临床上的应用。因此本文通过对内吗啡肽加以修饰改造希望寻找有强效镇痛作用且其抗酶解能力强，持续作用时间长，副作用低的新型镇痛药物模型。
　　 本论文将非天然氨基酸或二肽片段(Sar，D-Ala-Gly，Phg，Hfe)引入到EM-1的2和3位，且将其4位全部用D-Val4-NH-Bzl取代，通过经典液相法合成了四个EM-1的类似物并对它们的生理和药理学活性进行了检定，包括受体亲和实验，离体生物学活性检定，酶解稳定性以及在体镇痛活性的测定。我们发现所有类似物酶解稳定性都比EM-1高，只有类似物1[Sar2，D-Val4-HH-Bzl]EM-1的μ-阿片受体的亲和活性，离体生物学活性以及镇痛活性效能均比EM-1高；类似物2对μ-阿片受体亲和活性略低于EM-1，但是在所有类似物中对δ-阿片受体亲和活性最高(δ)Ki达到了142nM，而EM-1的(δ)Ki是5093nM，表明Tyr-D-Ala-Gly作为信息序列对配体与δ-阿片受体之间的作用产生了一定的影响，推测类似物2可能对μ和δ-阿片受体同时产生激动作用，具有双受体激动效应；其余两个类似物除了抗酶解能力均比EM-1强之外，它们对μ-阿片受体的亲和活性，离体生物学活性以及镇痛活性效能均不同程度的下降，尤其是类似物4[Phg3，D-Val4-NH-Bzl]EM-1基本上丧失了对μ-阿片受体的亲和活性和激动活性。

目录

文摘

英文文摘

声明

第一章前言

一、内吗啡肽的研究进展

1.阿片受体及阿片肽的发现

2.阿片受体的分布

3.内吗啡肽的发现

4.内吗啡肽的分布

5.内吗啡肽与μ-阿片受体

6.内吗啡肽的生理及药理学功能

二、内吗啡肽的构效关系研究

1.内吗啡肽的构象研究

2.内吗啡肽改造及其类似物研究

本章小结

参考文献

第二章立题依据及研究目的

第三章 EM-1及其类似物的设计与合成

1.EM-1及其类似物的合成策略

2.实验材料

2.1氨基酸及化学合成试剂

2.2实验仪器

3.合成方法和步骤

3.1 EM-1的合成

3.2 H-Tyr-Sar-Trp-D-Val-NH-Bzl的合成

3.3 H-Tyr-D-Ala-Gly-Trp-D-Val-NH-Bzl的合成

3.4 H-Tyr-Pro-Hfe-D-Val-NH-Bzl的合成

3.5 H-Tyr-Pro-Phg-D-Val-NH-Bzl的合成

本章小结

第四章 EM-1及其类似物的生理和药理学活性研究

1.实验材料

1.1实验动物

1.2实验仪器

1.3药品和试剂

2.实验方法

2.1放射性配体竞争结合实验

2.2离体生物学活性检定实验

2.3镇痛实验

2.4离体酶解稳定性实验

2.5统计方法

3.实验结果

4.讨论

参考文献

在读硕士期间发表论文

附录

致谢