单侧输尿管完全梗阻后肾小管上皮细胞凋亡及HO-1、bFGF表达的研究

摘要

目的：研究单侧输尿管完全梗阻对肾小管上皮细胞凋亡、HO-1和bFGF在肾小管中表达的影响。
　　方法：将实验用SD大鼠80只，随机分为手术组与假手术组，前者再进一步随机分为单侧输尿管完全梗阻3、5、7天组，各组20只。用0.01％戊巴比妥钠，按1ml/kg腹腔注射麻醉，取下腹部正中切口进入腹腔，找到膀胱，于其附近分离显露一侧输尿管，在输尿管下1/3段切断并用1号丝线分别结扎远、近断端，缝合切口继续饲养；假手术组仅行单侧输尿管显露。手术组术后第3、5、7天麻醉后取出对应时间组双侧肾脏，假手术组肾脏术后第7天同时取出，用8%的甲醛固定待用。所取标本均行HE染色观察组织细胞形态的病理变化，TUNEL染色法计算肾小管上皮细胞凋亡率，免疫组化检测肾小管HO-1及bFGF的表达。
　　结果：80只实验用大鼠全部满足实验设计，无术后意外死亡。手术组随梗阻时间延长，患侧肾脏体积逐渐增大，表面色泽灰暗，质地变韧，输尿管、肾盂扩张，皮质变薄；HE染色可见肾小球逐渐萎缩呈玻璃样变，肾小管上皮细胞空泡样变性，肾间质内大量单核、淋巴细胞弥漫浸润，肌成纤维细胞弥漫增生；肾小管上皮细胞凋亡增加；免疫组化可见各组大鼠梗阻侧肾脏中均存在HO-1、bFGF蛋白表达，阴性对照均未见阳性表达，HO-1、bFGF主要表达于肾小管，梗阻后阳性表达明显增加，随梗阻时间延长， HO-1的阳性表达减弱， bFGF的阳性表达增强，差异均具有统计学意义（P<0.05）；相关分析发现：HO-1的表达与肾小管上皮细胞的凋亡率呈负相关，bFGF的表达与肾小管上皮细胞的凋亡率呈正相关，相关系数 r检验存在显著性差异（P<0.05）。梗阻对侧肾脏体积形态学改变不明显，仍存在肾小管上皮细胞凋亡，但随梗阻时间延长，凋亡率变化相对较缓慢。
　　结论：单侧输尿管完全梗阻后，梗阻侧及梗阻对侧均发生肾小管上皮细胞凋亡，且随梗阻时间延长，细胞凋亡率升高，以梗阻侧明显，梗阻对侧变化相对缓慢；输尿管梗阻后肾小管中HO-1、bFGF的表达强度与梗阻持续时间有关，其中HO-1的表达强度随梗阻时间延长而减弱，与肾小管上皮细胞凋亡率呈负相关，可能其在单侧输尿管梗阻过程中具有抑制细胞凋亡等保护性作用；bFGF的表达强度随梗阻时间延长而增强，与肾小管上皮细胞凋亡率呈正相关，其在梗阻性肾病肾小管纤维化的过程中的促进作用已有论证；HO-1、bFGF可能参与了梗阻性肾病中肾实质细胞萎缩及肾小管纤维化的调节，并反应在蛋白表达水平上。

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前言

1 材料与方法

1.1 主要实验材料及仪器设备

1.2实验方法

1.3 统计学处理

2 结 果

2.1 实验样本肉眼观察

2.2 HE染色、光镜观察

2.3 TUNEL法染色镜下观察

2.4 HO-1在梗阻侧肾小管上皮细胞中的表达

2.5 bFGF在梗阻侧肾小管中的表达

2.6 HO-1、bFGF在梗阻侧肾脏不同时段表达的IOD值

2.7 肾小管内HO-1、bFGF的表达与肾小管上皮细胞凋亡的相关性

3 讨 论

3.1 单侧输尿管完全梗阻模型的应用

3.2 输尿管完全肾小管上皮细胞凋亡的变化

3.3 HO-1在梗阻性肾病中的表达及意义

3.4 bFGF在梗阻性肾病中的表达及意义

4 结 论

参考文献

综述: 血红素加氧酶1、碱性成纤维细胞生长因子及细胞凋亡在梗阻性肾病中的研究

致谢

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