纳秒脉冲对舌鳞癌细胞cal-27生长影响的体内研究

摘要

恶性肿瘤是是严重威胁人类健康和生命的常见病和多发病，严重威胁着人类健康。而据世卫组织（World Health Organization,WHO）统计，口腔癌已成为全世界十大最常见癌症之一，每年约有超过26万新发口腔癌病例。尽管近几十年来，早期预防或诊断的医疗措施对其他恶性肿瘤的生存率有了明显改善，但是口腔恶性肿瘤的致死率仍稳居高位，5年平均生存率依然接近50％，治疗方法仍然是个急需解决的难题。
　　近来，脉冲电场技术逐渐进入人们的视野，它能够引起细胞内电处理效应(Intracellular Electromanipulation,IEM)，具有能够诱导肿瘤细胞结构和功能发生变化的作用，其中纳秒级陡脉冲电场(Nanosecond Pulsed Electric Fields,nsPEFs)技术能够对细胞质膜、细胞器膜及核膜产生作用，使其发生基本形态或结构以及通透性改变等功能的变化进而刺激细胞发生凋亡(Apoptosis)即程序性死亡现象(Programmed death，PD),在肿瘤的治疗及应用领域中展现出光明的发展前景。但目前大多数的研究限于体外实验的研究，相关体内实验研究尚不充分。本研究是以背部肩胛骨皮下接种人口腔鳞癌细胞Cal-27的裸鼠为研究对象，观察不同参数的电场对裸鼠肿瘤生长抑制的作用效果,来探讨对舌癌体内生长的影响，证明对荷瘤裸鼠的抗肿瘤效果和作用机制，为纳秒脉冲电场在舌鳞癌临床治疗提供新的方案和一定的理论依据。
　　建立舌鳞癌Cal-27细胞裸鼠皮下肿瘤模型，使用脉宽100ns，电场强度50Kv/cm重复频率1HZ，脉冲次数分别为50、100、200pulse的脉冲电场纳秒脉冲分别处理裸鼠，测量瘤体体积变化，并以此描绘肿瘤体积生长变化图；使用HE染色法观察瘤体细胞，进行肿瘤的病理学检查；免疫组织化学法检测处理后的移植瘤组织中bax和bcl-2的表达变化。结果显示，治疗结束时，与对照组相比，脉冲处理组瘤体体积明显减小（P＜0.05）；随着脉冲次数的加大，抑瘤效果增强。免疫组织化学染色显示处理组中Bcl-2的表达水平较对照组有所降低，而Bax的表达明显增多（P<0.05），这些结果表明，纳秒脉冲电场能抑制舌鳞癌Cal-27细胞裸鼠移植瘤的生长，表明nsPEFs未来可作为一种新的治疗舌鳞癌的方法。
　　结论：
　　1.成功构建了舌鳞状细胞癌Cal-27裸鼠皮下移植瘤模型。
　　2.纳秒脉冲电场能够显著抑制裸鼠移植瘤的增殖，其抑制作用呈现参数依赖性。
　　3.抑制作用可能与上调Bax表达、下调Bcl-2表达诱导肿瘤细胞凋亡有关。