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乌灵胶囊联合卡马西平通过HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路逆转难治性癫痫耐药的作用机制研究

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第一章 前言

1.1 癫痫概述

1.2 癫痫所致脑损伤

1.3 炎症反应与癫痫耐药机制

1.4 中西医药联合治疗癫痫的进展

1.4.1 中西医治疗癫痫的研究概况

1.4.2 卡马西平联合中药治疗癫痫的研究概况

1.4.3 乌灵胶囊治疗癫痫的研究概况

1.5 研究假说

第二章 材料与方法

2.1 实验材料

2.1.1动物

2.1.2仪器

2.1.3试剂与药品

2.2 技术路线图

2.3 KA诱导难治性癫痫模型

2.4 分组及给药

2.5 行为学观察

2.6 Morris水迷宫实验

2.7 HE染色病理切片制备

2.7.1石蜡切片的制备

2.7.2 苏木精-伊红(HE)染色

2.8 药动学实验

2.8.1分组、给药及组织样品的采集

2.8.2 血液及脑组织中CBZ定量测定

2.9 免疫组化实验步骤

(1) 取材及石蜡切片的制备

(2)Envision 免疫组化(E.V.)二步法 实验参照文献方实施

(3)染色计数

2.10 RT-PCR实验步骤

(1) 前期准备

(2) 总 RNA 的提取

(3)反转录应

(4) 实时荧光定量 RT-PCR 反应

(5)结果处理

2.11 Western blot实验步骤

(1)大鼠海马组织总蛋白的提取

(2) BCA 法蛋白质定量

(3)试剂的配制

(4) 制胶

(5)上样

(6)电泳

(7) 转膜

(8) 封闭

(9) 免疫反应

(10) 曝光、显影

(11) 结果处理

2.12 统计分析

第三章 结果

3.1 造模结果评价

3.2 行为学结果

3.3 Morris水迷宫实验结果

3.3.1 定位航行实验结果

3.3.2 空间探索实验结果

3.4 HE染色结果

3.5 药动学实验结果

3.5.1 方法专属性

3.5.2 标准曲线

3.5.3 准确度与精密度

3.5.4 绝对回收率

3.5.5 乌灵胶囊对CBZ在癫痫大鼠血浆中的药动学影响

3.5.6 乌灵胶囊对CBZ在癫痫大鼠脑组织中分布的影响

3.6 免疫组化实验结果

3.7 RT-PCR实验结果

3.8 Wetern Blot实验结果

第四章 讨论

4.1 乌灵胶囊联合CBZ对癫痫大鼠行为学变化的影响

4.2 乌灵胶囊联合CBZ对癫痫大鼠学习记忆能力的影响

4.3 乌灵胶囊联合CBZ对癫痫大鼠海马组织CA3区病理性变化的影响

4.4 乌灵胶囊联合CBZ对癫痫大鼠血液及脑组织内药物浓度的影响

4.5 乌灵胶囊联合CBZ对癫痫大鼠脑组织内HMGB1、TLR4、NF-κBp65及P-gp表达的影响

第五章 结论

参考文献

不足之处及展望

在学期间的研究成果

致谢

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