KAI1基因及其蛋白在体内外与肿瘤转移相关性的研究

摘要

KAI1基因是近年来最新发现的一种肿瘤转移抑制基因.1995年由Dong J.T.在Science首先报道后,KAI1抑制肿瘤转移的作用已经在不同转移潜能的肿瘤和癌细胞中得到证实.但是到目前为止,KAI1表达的调控机制、KAI1产物的作用机制仍未阐明.该课题通过应用细胞生物学、分子生物学、免疫生物学、实验动物学等先进技术,从不同层次上深入探讨了KAI1基因及其蛋白的重要生物学功能;通过分析KAI1和肿瘤抑制基因p53的相关性来探讨KAI1抑制肿瘤转移的可能机制,并发现了能够有效激活KAI1/CD82蛋白表达水平的特异性抗癌药物VP16,为临床治愈肿瘤转移提供新思路和理论依据.该文的创新点:1.首次观察并发现了KAI1/CD82蛋白在经抗癌药物作用后,蛋白定位在肿瘤细胞内发生的显著变化.2.立足于对KAI1和p53相关性的研究,初步探讨了KAI1与p63的相关性.3.体内外联合验证了抗肿瘤药物VP16对KAI1/CD82蛋白表达的诱导作用,为VP16在临床上抑制肿瘤转移提供有力的实验依据.

目录

文摘

英文文摘

前言

一、肿瘤转移

二、肿瘤转移相关基因

1.肿瘤转移“诱导”基因

2.肿瘤转移抑制基因

3.癌基因、抑癌基因和肿瘤转移的相关性

三、肿瘤转移抑制基因KAI1

1.KAI1基因的发现

2.KAI1/CD82蛋白与肿瘤转移

3.KAI1基因与抑癌基因

四、现代肿瘤转移治疗的探讨

五、本课题研究应用的抗肿瘤药物-VP16

六、本课题研究的目的和内容

材料与方法

一、 实验材料

1.主要细胞系和裸鼠

2.主要化学试剂及抗体

3.主要仪器

二、实验方法

1.细胞培养液及试剂的配制

2.细胞培养和传代

3.细胞冻存与复苏

4.细胞的药物处理

5. 免疫组化分析临床肿瘤样品

6.组织细胞原位杂交技术

7. KAI1/CD82蛋白流式细胞术免疫分析

8.蛋白提取和WesternBlot

9.激光扫描共聚焦显微镜观察样品制备

10.裸小鼠胃癌肝转移实验

结果与分析

一、 临床肿瘤标本KAI1 mRNA及其蛋白表达的观察

二、 抗肿瘤药物和抗肿瘤活性化合物对KAI1/CD82蛋白表达的诱导作用

三、 KAI1/CD82蛋白与p53和p63蛋白的相关性

四、 VP16对胃癌细胞裸小鼠肝转移能力的影响

讨论与结论

一、 KAI1基因及其蛋白在肿瘤标本中表达的意义

二、 不同来源的肿瘤细胞表达KAI1/CD82蛋白差异的分析

三、 VP16诱导KAI1/CD82蛋白表达的可能机理

四、 VP16抑制体内裸鼠胃癌细胞SGC-7901转移的意义

五、 总结与展望

参考文献

致谢