菲和3-甲基胆蒽对褐菖鲉生殖机能的影响

摘要

本实验以我国沿海常见的鱼类褐菖鲉(Sebastiscusmarmoratus)为主要研究对象，在生态条件下，在环境污染的浓度范围内，通过多环芳烃菲和3-甲基胆蒽(0.06、0.6、6μg/L)的长期慢性暴露实验，对生殖功能相关的生理生化指标进行观察测定，以分析两者对鱼类生殖机能的影响及作用机理，同时分析低环数PAHs和高环数PAHs在鱼类生殖机能毒性作用中的不同作用和机制。 1．Phe和3MC的代谢。Phe暴露50d后，除雄性低浓度组肝脏的GST活性显著升高外，其他各组肝脏的EROD和GST活性与对照组比较都没有显著变化。表现了解毒酶系统中Ⅰ相酶与Ⅱ相酶中两种代表性酶对Phe暴露的不敏感。3MC的暴露诱导了EROD的活性。然而在3MC暴露下GST的活性未发生显著变化。 2．Phe和3MC对CⅡGnRH转录的影响。CⅡGnRH转录在Phe和3MC作用下受到了显著的影响。在雄鱼中Phe对脑CⅡGnRHmRNA水平造成显著的升高，呈剂量依赖性效应。在雌鱼中，Phe暴露诱导CⅡGnRHmRNA的升高，其中中浓度组升高最多。相似的现象也表现在3MC的暴露下，在雄鱼和雌鱼中出现了低中浓度诱导，高浓度抑制的显著性变化。 3．Phe和3MC对性腺的影响。在Phe和3MC影响下，精子发生和卵巢的性体比下降，精巢和卵巢中17β-雌二醇水平显著下降，这可能是精巢中精子发育迟滞的主要原因。 本实验观察到低浓度的Phe和3MC暴露即可对精巢发育造成显著的迟滞作用。这一研究结果为多环芳烃污染的控制提出了新的值得注意的问题，为环境政策的制定提供了理论依据。Phe和3MC对精巢发育的迟滞作用可能是通过对17β-雌二醇的抑制介导的，实验结果表明表明雌二醇不但调节卵巢发育，在精巢的发育过程中也有关键性的控制作用。多环芳烃还可能通过对CⅡGnRH的影响造成性激素水平的变化，从而实现对性腺发育的调控。这为研究多环芳烃对鱼类生殖机能的影响提供了思路。

目录

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声明

第一章前言

1.1.多环芳烃的污染现状

1.2.多环芳烃对鱼类的毒性作用

1.3.硬骨鱼类的生殖过程

1.4.多环芳烃对硬骨鱼类的生殖毒性效应

1.5.本研究的目的和意义

第二章材料与方法

2.1.材料

2.2.实验仪器

2.3.主要试剂

2.4.沙滤海水中菲本底测定

2.5.CⅡGnRH cDNA的克隆和测序

2.6.实时荧光定量PCR检测脑中CⅡGnRH转录水平

2.7.肝脏组织中菲浓度的测定

2.8.肝脏中EROD与GST活性的测定

2.9.性腺组织学切片制作

2.10.性腺中性激素水平测定

2.11.数据处理

第三章结果与分析

3.1.CⅡGnRH基因克隆测序结果

3.2.海水中菲本底浓度

3.3.菲对雄鱼各项相关生理指标影响结果

3.4.菲对雌鱼各项生理指标影响结果

3.5. 3-甲基胆蒽对雄鱼各项生理指标影响结果

3.6. 3-甲基胆蒽对雌鱼各项生理指标影响结果

第四章讨论

4.1.菲与3-甲基胆蒽在褐菖鲉体内的代谢

4.2.菲和3-甲基胆蒽对CⅡGnRH影响

4.3.菲和3-甲基胆蒽性激素的影响

4.4.菲和3-甲基胆蒽对性腺组织学水平影响

第五章结论与展望

参考文献

致谢