菲、3-甲基菲和菲醌对暗纹东方鲀(Takifugu fasciatus)毒性的比较研究

摘要

多环芳烃(Polycyclic Aromatic Hydrocarbons，PAHs)是环境中普遍检出的污染物之一。烷基多环芳烃(Alkyl-Polycyclic Aromatic Hydrocarbons，Alkyl-PAH)占石油毒性组分PAHs的80％以上，氧化多环芳烃(Oxy-Polycyclic AromaticHydrocarbons，PAH)是PAHs环境转化过程中的重要产物，但当前针对烷基多环芳烃和氧化多环芳烃的研究较少，其毒性大小与作用机制均不明晰。因此，本文以菲、烷基化合物和多环芳烃氧化衍生物为目标化合物，以大连经济鱼种暗纹东方鲀（Takifugu fasciatus）为受试生物，从代谢酶、氧化应激反应、肝脏和组织残留等层面，比较分析了菲、3-甲基菲和菲醌的毒性大小及可能的代谢转化过程，研究结果如下:
　　(1)暗纹东方鲀在菲、3-甲基菲和菲醌中分别暴露7d后，结果显示高浓度菲对EROD呈诱导效应，3-甲基菲对其无显著影响，而菲醌则对其呈抑制效应。三种化合物对GST活性均呈诱导效应，在各自高浓度时较为显著;与GST相比，三者对LDH活性的诱导效应较弱，仅在菲200μg/L时有显著效应。
　　(2)暗纹东方鲀肝脏中MDA活性结果显示，三种化合物都引起了肝细胞较为明显的氧化损伤，但同一浓度下，3-甲基菲要强于菲。
　　(3)三种化合物母体及代谢物在暗纹东方鲀胆汁和肝脏中的残留浓度结果显示，肝脏中代谢物含量与暴露浓度物显著相关性，但胆汁中代谢物含量随暴露浓度升高而升高。荧光谱图结果表明，三种化合物母体在胆汁中并不是主要成分，大部分可能以代谢物的形式存在。
　　(4)暗纹东方鲀肝细胞超显微结构的结果表明，三种化合物对肝细胞结构均产生了明显的损伤。在高浓度菲和3-甲基菲(400μg/L)暴露下，肝细胞损害严重，线粒体和内质网也遭到不同程度的破坏;而随着菲醌浓度的升高，线粒体肿胀异常明显，内质网水肿也愈发严重，对细胞内的细胞器造成了明显的损伤。

目录

声明

摘要

第1章 前言

1．1 研究背景

1．2 环境中的多环芳烃及其毒性效应

1．2．1 环境中的多环芳烃及其毒性效应

1．1．2 烷基多环芳烃及其毒性效应

1．2．3 氧化多环芳烃及其毒性效应

1．3 生物标志物的研究

1．3．1 Ⅰ相酶(CYP450)的相关研究

1．3．2 Ⅱ相酶酶活性相关研究

1．3．3 代谢物

1．3．4 氧化应激性相关研究

1．3．5 肝组织结构影响相关研究

1．4 暗纹东方鲀

1．5 研究内容和技术路线

1．5．1 研究内容

1．5．2 技术路线

第2章 材料与方法

2．1 受试生物

2．2 实验设计

2．2．1 实验用鱼的选择

2．2．2 暴露设计

2．2．3 仪器与试剂

2．3 样品采集与处理

2．3．1 匀浆介质的制备

2．3．2 电镜分析样品保存液的配制

2．3．3 样品采集

2．3．4 上清液提取

2．4 测定方法

2．4．1 EROD酶活性测定

2．4．2 GST和LDH的测定

2．4．3 脂质过氧化的测定

2．4．4 蛋白含量的测定

2．4．5 胆囊代谢物的测定

2．4．6 肝脏代谢物的测定

2．4．7 肝脏及胆囊代谢物浓度的测定

2．4．8 肝细胞超微结构的测定

2．5 数据处理

第3章 菲、3-甲基菲、菲醌对暗纹东方鲀代谢酶影响

3．1 菲、3-甲基菲和菲醌对暗纹东方鲀Ⅰ相酶EROD活性的影响

3．2 菲、3-甲基菲和菲醌对暗纹东方鲀Ⅱ相酶GST和LDH活性影响

3．3 菲、3-甲基菲和菲醌对暗纹东方鲀Ⅰ相和Ⅱ相酶活性影响探讨

第4章 菲、3-甲基菲、菲醌对暗纹东方鲀肝脏氧化损伤影响

4．1 菲、3-甲基菲和菲醌对暗纹东方鲀肝氧化损伤结果

4．2 菲、3-甲基菲和菲醌对暗纹东方鲀氧化损伤影响探讨

第5章 暗纹东方鲀体内肝脏和胆囊中代谢物及含量

5．1 暗纹东方鲀体内肝脏和胆囊中代谢物

5．2 暗纹东方鲀体内肝脏和胆囊中含量

5．3 肝脏和胆囊中代谢物及含量的探讨

第6章 菲、3-甲基菲、菲醌对肝脏组织超微结构的影响

6．1 菲、3-甲基菲、菲醌对肝脏组织超微结构影响结果

6．2 肝脏组织超微结构的结果探讨

第7章 总结

参考文献

攻读学位期间公开发表论文

致谢

作者简介