模式生物果蝇中抗DV病毒果蝇株的筛选研究

摘要

果蝇作为十分活跃的模式生物，在20世纪生命科学发展历程中扮演了十分重要的角色。遗传学研究、发育的基因调控研究、各类神经疾病研究、帕金森氏病、老年痴呆症、药物成瘾和酒精中毒、衰老与长寿、学习记忆与某些认知行为的研究等都有果蝇的“身影”。2000年，果蝇全基因组测序基本完成，这将把对果蝇的研究推入一个新的阶段。
　　 DCV病毒(drosophila C virus，果蝇C病毒)是一种单链正向无包膜的RNA病毒，类似于脊椎动物小RNA病毒，是模式生物果蝇中普遍存在的一种病毒，约由9300个核苷酸组成。研究表明出生后20个小时龄期果蝇的卵对DCV病毒非常敏感，同时成体果蝇显微注射DCV病毒到其体液中3～4天死亡率提高。
　　 本实验采用高滴度DCV病毒及化学诱变剂EMS，对来自Bloomington Stock Center的果蝇株6599进行累积筛选。首先对11000多只20小时龄期的果蝇的卵用DCV病毒进行筛选，存活的个体扩增起来，然后对其下一代的3000多只雄性果蝇进行EMS筛选，EMS筛选获得的存活个体与处女蝇杂交。扩增这些突变个体，后对这些突变个体进行又一轮喂食高滴度DCV来进行筛选，通过这样一个过程最终筛选到几株抗DCV病毒的果蝇株。
　　 经过以上的实验步骤，最终获得了3株抗DCV病毒的果蝇株，编号为124、I36和J49，以及其它几株相对抗DCV病毒的果蝇株。下一步计划对这些果蝇株进行下再纯化，然后对其部分基因组进行高通量和/或全基因组测序，最后想通过基因组对比分析，找出差异，进而发现和确认导致果蝇抗DCV病毒的基因或信号通路。从而为进一步研究和发现哺乳类的抗病毒通路提供思路和借鉴。