去泛素化酶USP7与ULF、ARF蛋白相互作用的研究

摘要

肿瘤抑制蛋白ARF由INK4a-ARF基因座所编码,在抑制肿瘤发生方面发挥着重要的作用。ARF蛋白主要通过激活p53信号通路,引起细胞周期阻滞或凋亡,从而抑制肿瘤的发生。另外,ARF蛋白还可以通过非p53依赖性途径发挥其肿瘤抑制功能。
　　 由于ARF在肿瘤抑制方面的重要作用,细胞中存在多种方式对ARF的表达进行严格、精细的调控。其中由ULF介导的泛素化是从转录后水平对ARF蛋白进行调控的重要方式。
　　 蛋白的泛素化是一个可逆的过程。去泛素化作用对许多重要蛋白的水平和功能发挥着关键性的调控。参与蛋白去泛素化的特异性水解酶(去泛素化酶)是一类蛋白酶超家族,USP7则是其中一个重要的成员。
　　 我们的工作在前人研究基础上,利用免疫共沉淀技术,证实了去泛素化酶USP7与ARF的泛素连接酶ULF在细胞内的特异性结合。在此基础上,初步探讨了这种特异性结合对USP7和ULF蛋白稳定性的影响。我们发现,二者结合对USP7的蛋白稳定性没有影响,但是却能增强ULF的蛋白稳定性。经过进一步的研究发现,USP7对ULF的稳定效应与USP7的去泛素化酶效应相关,说明USP7很有可能去泛素化ULF。另一方面,我们利用免疫共沉淀和GST pull down技术,发现YSP7还可以和细胞中重要的肿瘤抑制蛋白ARF结合,相关的研究仍在进行中。该研究对于探索细胞中调控由ULF介导的ARF泛素化降解这一过程有一定的意义,也为后续的进一步深入研究打下了基础。