钙调蛋白等五个基因在人胃癌组织的表达及其启动子区甲基化修饰的研究

摘要

【目的】通过检测胃癌组织中钙调蛋白等五个基因的表达及与临床病理特征的关系，并分析幽门螺杆菌的感染引起上述基因启动子区甲基化水平的修饰，为幽门螺杆菌感染促进胃癌发生、发展的机制提供一定的理论和实验依据。
　　【方法】用实时定量 PCR的方法检测钙调蛋白、钙网蛋白、氯离子通道、β-肌动蛋白及周期蛋白依赖性激酶1五个基因在临床胃癌组织、淋巴结组织及癌旁组织中的表达，计算其相对表达水平；分析这些基因的表达与临床病理特征及胃癌组织中幽门螺杆菌感染状态的相关性；使用亚硫酸氢盐修饰后测序法检测幽门螺杆菌感染的胃癌细胞株 SGC-7901及稳定表达cagA基因的胃癌细胞株 SGC-7901中上述五个基因启动子区甲基化水平。
　　【结果】钙调蛋白、钙网蛋白、氯离子通道、β-肌动蛋白及周期蛋白依赖性激酶1五个基因在人胃癌组织及淋巴结组织的表达显著高于癌旁组织(P<0.05)；与临床病理特征分析结果显示钙调蛋白基因的表达与淋巴结转移及患者生存时间相关(P<0.05)，钙网蛋白基因的表达与肿瘤大小、pTNM分期、患者生存时间及淋巴结转移相关(P<0.05)，氯离子通道基因的表达与pTNM分期及患者生存期相关(P<0.05)，β-肌动蛋白基因的表达与 pTNM分期及淋巴结转移相关(P<0.05)，周期蛋白依赖性激酶1基因的表达则与pTNM分期、患者生存期及淋巴结转移相关(P<0.05)；人胃癌组织中幽门螺杆菌的感染与钙调蛋白、氯离子通道及周期蛋白依赖性激酶1基因的表达上调相关（P<0.05）；幽门螺杆菌的感染可以引起钙调蛋白基因-276位点发生去甲基化和氯离子通道基因-3474位点的发生甲基化修饰。
　　【结论】人胃癌组织及淋巴结组织中钙调蛋白、钙网蛋白、氯离子通道、β-肌动蛋白及细胞周期依赖性激酶1基因表达显著升高，其中钙调蛋白、钙网蛋白及氯离子通道基因的表达与临床病理特征相关，而钙调蛋白、氯离子通道及周期蛋白依赖性激酶1基因的表达与人胃癌组织中幽门螺杆菌感染相关；幽门螺杆菌的感染可诱导钙调蛋白基因及氯离子通道基因发生甲基化修饰的改变。

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中文摘要

前言

胃癌流行病学

胃癌与幽门螺杆菌

课题组的前期研究

DNA甲基化与胃癌

DNA甲基化与幽门螺杆菌

材料与方法

1. 材料

2. 细胞培养

3. 幽门螺杆菌感染实验

4.Real-time PCR检测差异基因的表达

5 临床标本幽门螺杆菌感染的检测

6. 基因启动子区甲基化水平检测

7 统计学分析

结果

1. RNA纯度鉴定

2. 目的基因在人胃癌组织中的表达

3. 五个目的基因的表达与临床病理特征的关系

4. 胃癌组织中幽门螺杆菌的感染与目的基因的表达的关系

5. Hp感染后目的基因启动子甲基化水平检测

讨论

1. 五个基因在胃癌组织中的表达及其与Hp感染的关系

2. 五个基因的表达与临床病理特征的关系

3. DNA甲基化水平

结论

参考文献

英文摘要

创 新 点

基金资助项目

致谢

英文缩略词表

声明

综述一: 幽门螺杆菌致病机制研究的新进展

综述二: CIAPIN1基因与肿瘤