砷中毒大鼠空肠SP、SS、VIP、CD4、TNF-α免疫反应阳性细胞的表达及形态学研究

摘要

目的：探讨慢性砷中毒对大鼠空肠表达P物质（SP）、生长抑素（SS）、血管活性肠肽（VIP）、CD4、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）免疫反应阳性细胞的影响及与空肠形态结构改变的关系。
　　方法：将60只清洁级 SD大鼠，分为对照组（0.0 mg/kg）、低砷组（0.4mg/kg）、高砷组（10.0 mg/kg），分别自由饮用As2O3与蒸馏水配制的染毒水溶液，浓度分别为0、2、50 mg/L，连续染毒4个月。采用HE染色、PAS反应观察砷中毒大鼠空肠一般形态结构变化、免疫组化SABC法显示SP、SS、VIP、CD4、TNF-α免疫反应阳性细胞，Biomias图象分析软件检测空肠纹状缘厚度，SP、SS、CD4、TNF-α免疫反应阳性细胞数及平均灰度值；VIP免疫反应阳性细胞、阳性神经纤维面积及平均灰度值。
　　结果：1.对照组大鼠进食饮水正常，毛发光泽，精神状态良好；染砷组量染砷组大鼠毛发粗糙，精神萎靡，易激惹，体重降低。高、低剂量染砷组大鼠尿砷、血砷浓度(7366.6±1086.50、31.59±9.24)ug/L、(1744.31±300.12、16.58±2.08)ug/L高于对照组(18.97±3.58、5.44±3.36)ug/L，p<0.05，3组对比差异有统计学意义。2.HE染色观察，染砷组大鼠空肠绒毛结构不规则；固有层内有炎性细胞浸润，血管扩张。3. PAS反应观察，染砷组纹状缘不整齐，变薄，油镜下测量纹状缘厚度，高、低剂量染砷组（2.06±0.13）、（2.29±0.13）低于对照组（2.83±0.18），p<0.05，3组对比差异有统计学意义。4.免疫组织化学SABC法显示：①3组大鼠空肠SP免疫反应阳性细胞计数比较，其中高、低剂量组染砷组（4.24±0.33）、（1.85±0.25）个/视野，高于对照组（0.94±0.21）个/视野，p<0.05，差异有统计学意义。3组大鼠免疫反应阳性细胞灰度值比较，高、低剂量染砷组（118.30±4.58）、（125.13±2.35）低于对照组（133.76±3.61），p<0.05，差异有统计学意义。②3组大鼠空肠 SS免疫反应阳性细胞计数比较，高、低剂量染砷组（3.31±0.41）、（1.83±0.24）个/视野，高于对照组（1.14±0.14）个/视野，p<0.05，差异有统计学意义。3组大鼠免疫反应阳性细胞灰度值比较，高、低剂量染砷组（124.03±3.94）、（131.28±5.66）低于对照组（137.57±5.49），p<0.05,差异有统计学意义。③3组大鼠空肠VIP免疫反应阳性细胞及阳性神经纤维面积比较，高、低剂量组染砷组（643.17±54.69）、（252.07±42.96），高于对照组（113.80±24.04），p<0.05，差异有统计学意义。3组大鼠免疫反应阳性细胞及阳性神经纤维平均灰度值比较，高、低剂量染砷组（103.17±4.74）、（114.42±2.59）低于对照组（126.78±3.62），p<0.05，差异有统计学意义。④3组大鼠空肠CD4免疫反应阳性反应细胞计数统计，与对照组（9.22±1.30）个/视野比较，低剂量染砷组（14.40±2.33）个/视野增高、高剂量组（5.52±1.44）个/视野降低，p<0.05，差异有统计学意义。3组大鼠CD4免疫反应阳性细胞灰度值统计，与对照组（116.60±3.22）比较，低剂量染砷组（105.50±5.29）降低，高剂量染砷组（121.22±3.71）增高，p<0.05，差异有统计学意义。⑤3组大鼠空肠TNF-α免疫反应阳性细胞计数比较，高、低剂量组染砷组（11.60±1.00）、（9.09±1.30）个/视野，高于对照组（5.59±0.89）个/视野，p<0.05，差异有统计学意义。3组大鼠免疫反应阳性细胞灰度值比较，高、低剂量染砷组（102.11±2.32）、（114.256±3.39）低于对照组（127.94±3.96），p<0.05，差异有统计学意义。
　　结论：1、砷中毒可致大鼠空肠结构损伤；2、砷中毒可致大鼠空肠内SP、SS、TNF-α免疫阳性细胞计数增多，VIP免疫反应阳性细胞及阳性纤维面积增大，SP、SS、VIP、TNF-α表达增强；3、低剂量砷中毒可致大鼠空肠CD4免疫反应阳性细胞表达增多，高剂量砷中毒可致大鼠空肠 CD4免疫反应阳性细胞表达降低；4、砷中毒可影响大鼠空肠内分泌及免疫系统功能。

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