砷中毒大鼠空肠形态结构及CD68、IL-2、CD8、EGF、NT阳性细胞表达的研究

摘要

目的:探讨砷中毒对大鼠空肠形态结构及巨噬细胞标记物（CD68）、白介素-2（IL-2）、CD8、表皮生长因子（Epidermal Growth Factor，EGF）、神经降压素(Neurotensin,NT)阳性细胞的影响。
　　方法:将60只清洁级SD大鼠分为对照组（0.0 mg/kg）、低砷组（0.4 mg/kg）、高砷组（10.0 mg/kg），分别自由饮用As2O3与蒸馏水配制的染毒水溶液，连续染毒4个月。采用氢化物发生电感耦合等离子发射光谱法测定尿砷、血砷的含量，HE染色、PAS反应观察染砷组大鼠空肠一般形态结构变化，免疫组化SABC法显示CD68、IL-2、CD8、EGF、NT阳性细胞，Biomias图象分析软件检测空肠杯状细胞数及平均灰度值、CD68、IL-2、CD8、EGF、NT阳性细胞数及平均灰度值，应用SPSS11.5统计分析软件进行统计分析。
　　结果:1.对照组大鼠进食饮水正常，毛发光泽，精神状态良好；染砷组大鼠毛发粗糙，精神萎靡，易激惹，体重降低。2.高、低剂量染砷组大鼠尿砷、血砷浓度明显高于对照组，p<0.05，差异有统计学意义。3.HE染色观察，染砷组大鼠空肠部分绒毛不整齐，固有层内有炎性细胞浸润。4. PAS反应观察，杯状细胞数目增多，高、低剂量染砷组杯状细胞计数高于对照组，p<0.05，差异有统计学意义。三组大鼠杯状细胞灰度值比较，高、低剂量染砷组杯状细胞平均灰度值低于对照组，p<0.05，差异有统计学意义。5.免疫组织化学 SABC法显示：①三组大鼠空肠 CD68阳性细胞计数比较，高、低剂量染砷组 CD68阳性细胞计数高于对照组，p<0.05，差异有统计学意义。三组大鼠CD68阳性细胞平均灰度值比较，高、低剂量染砷组 CD68阳性细胞平均灰度值低于对照组，p<0.05，差异有统计学意义。②三组大鼠空肠IL-2阳性细胞计数比较，与对照组相比，低剂量染砷组IL-2阳性细胞计数增高，高剂量染砷组IL-2阳性细胞计数降低，p<0.05，差异有统计学意义。三组大鼠IL-2阳性细胞平均灰度值比较，与对照组相比，低剂量染砷组 IL-2阳性细胞平均灰度值降低，高剂量染砷组 IL-2阳性细胞平均灰度值增高，p<0.05，差异有统计学意义。③三组大鼠空肠CD8阳性细胞计数比较，高、低剂量染砷组CD8阳性细胞计数高于对照组，p<0.05，差异有统计学意义。三组大鼠CD8阳性细胞平均灰度值比较，高、低剂量染砷组CD8阳性细胞平均灰度值低于对照组，p<0.05，差异有统计学意义。④三组大鼠空肠 EGF阳性细胞计数比较，高、低剂量染砷组 EGF阳性细胞计数高于对照组，p<0.05，差异有统计学意义。三组大鼠EGF阳性细胞平均灰度值比较，高、低剂量染砷组EGF阳性细胞平均灰度值低于对照组，p<0.05，差异有统计学意义。⑤三组大鼠空肠NT阳性细胞计数比较，与对照组相比，低剂量染砷组NT阳性细胞计数增高、高剂量染砷组NT阳性细胞计数降低，p<0.05，差异有统计学意义。三组大鼠 NT阳性细胞平均灰度值比较，与对照组相比，低剂量染砷组 NT阳性细胞平均灰度值降低，高剂量染砷组 NT阳性细胞平均灰度值增高，p<0.05，差异有统计学意义。
　　结论：1、砷可致大鼠空肠结构损伤：空肠部分绒毛不整齐，炎性细胞增多，杯状细胞数目增多及平均灰度值降低。2、砷可致大鼠空肠内 CD68、CD8、 EGF阳性细胞计数增多，CD68、CD8、EGF表达增强,与砷染毒剂量呈正相关。3、低剂量砷可致大鼠空肠IL-2、NT阳性细胞计数增多，IL-2、NT表达增强，与砷染毒剂量呈正相关；高剂量砷可致大鼠空肠IL-2、NT阳性细胞计数减少，IL-2、NT表达减弱，与砷染毒剂量呈负相关。4、砷可影响大鼠空肠相关免疫细胞及EGF、NT阳性细胞。

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