糖尿病大鼠血糖控制前后肾小管上皮细胞E2A和Id2蛋白表达变化的研究

摘要

目的：动态观察分化抑制因子Id2、E2A及E-cadherin蛋白在糖尿病大鼠血糖控制前后肾小管上皮细胞的表达变化，探讨三者在肾小管间质纤维化和肾小管上皮细胞向间充质细胞转分化过程(EMT)中可能发挥的作用及相互关系。
　　方法：雄性SD大鼠随机分为正常对照组（N）、糖尿病组（DM），糖尿病胰岛素治疗组(DMT)。采用链脲佐菌素（55mg/kg）尾静脉注射复制Ⅰ型糖尿病大鼠模型，N组和DM组成模后分别于2周（2w）、8周（8w）、16周（16w）、24周（24w）处死；成模13周起，DMT组大鼠采用胰岛素个体化治疗，以血糖控制在4-7mmol/L，尿糖阴性为准，分别于16周和24周时处死各组大鼠。生化方法测血糖、24h尿蛋白，并计算肾脏指数。HE染色光镜下观察胰腺组织形态结构的变化，HE、PAS、Masson染色光镜下观察肾组织形态结构的变化。免疫组化观察大鼠肾脏FN蛋白的表达情况；Western blotting检测大鼠肾组织Id2、E2A、E-cadherin、α-SMA蛋白的变化；RT-PCR检测肾组织Id2 mRNA表达情况。
　　结果：（1）与N组相比，不同时间点DM组大鼠血糖、24h尿蛋白量、肾脏指数均显著升高(P<0.01)，并出现肾组织形态学异常改变；而DMT组大鼠血糖、24h尿蛋白量、肾脏指数均低于DM组(P<0.05)，肾纤维化病变改善。（2）与N组大鼠比较，DM大鼠肾组织Id2蛋白和mRNA的表达从2w开始减少，DM16w、24w显著减少(P<0.05),并伴有E-cadherin的表达减少（P<0.05）、α-SMA表达增加（P<0.05）和FN蛋白的沉积增多（P<0.05）。（3）与DM组相比，DMT组大鼠肾组织Id2蛋白和mRNA表达均明显增加（P<0.05)，肾组织E2A蛋白表达显著减少（P<0.05），且E-cadherin的表达增加（P<0.05）、α-SMA表达减少（P<0.05)和FN在间质的沉积减少（P<0.05）。
　　结论：（1）大鼠在持续糖尿病状态中，Id2蛋白在肾小管上皮细胞中的表达随病情的进展逐渐减少；E2A蛋白随病情的发展逐渐增多，且在16w后维持高表达水平。（2）胰岛素控制血糖能上调肾小管上皮细胞Id2蛋白的表达，降低E2A蛋白的表达，同时能延缓和减少肾小管上皮细胞的EMT及肾间质ECM的沉积，改善肾纤维化病变。

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前言

1.材料与方法

2.结果

3.讨论

结论

参考文献

英文摘要

致谢

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附：综述: 转录因子E2A的研究进展及与EMT的关系