三聚氰胺对雄性小鼠生殖毒性的实验研究

摘要

目的：
　　初步探讨三聚氰胺对雄性小鼠的生殖毒性及其毒性作用机制。
　　方法：
　　健康雄性昆明种小鼠50只，随机分为5组，每组10只，分别为生理盐水阴性对照组；三聚氰胺低、中、高剂量组:400、800、1600mg/(kg.d);环磷酰胺阳性对照组。各实验组小鼠连续给药5天，于首次染毒后的第35天处死。1.称量小鼠睾丸、附睾，计算脏器系数；2.显微镜下计数精子数量、精子活动率、精子畸形率；3.化学发光法测定小鼠睾酮（T）；4.比色法测定并计算小鼠睾丸组织超氧化物歧化酶（SOD）活力、丙二醛（MDA）含量及山梨醇脱氢酶（SDH）、乳酸脱氢酶（LDH）活力；5.睾丸病理切片HE染色，观察小鼠睾丸组织的病理学改变；6.流式细胞仪检测小鼠睾丸生精细胞凋亡率。7.免疫组化法检查凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3的表达。
　　结果：
　　1.三聚氰胺各剂量染毒组睾丸脏器系数下降，其中，中、高剂量组与阴性对照组比，差异有统计学意义（P＜0.01）；附睾脏器系数也下降，高剂量组与阴性对照组比，差异有统计学意义（P＜0.05）。
　　2.随着染毒剂量的增加，精子数量及精子活动率呈下降趋势，精子畸形率呈上升趋势，与阴性对照组比，差异均有统计学意义（P＜0.01或P＜0.05）。
　　3.各实验组睾酮水平升高，中剂量组与阴性对照组相比，差异有统计学意义（P＜0.05）。
　　4.随着三聚氰胺染毒剂量的增加，SOD活力下降，各剂量组与阴性对照组相比，差异均有统计学意义（P＜0.01）；MDA含量上升，其中低剂量组与阴性对照组相比，差异有统计学意义（P＜0.05），SDH活力呈下降趋势，各剂量染毒组与阴性对照组比，差异均有统计学意义（P＜0.01/P＜0.05）；LDH活力呈下降趋势，高剂量组与阴性对照组相比差异有统计学意义（P＜0.05）。
　　5.睾丸组织病理学切片可见三聚氰胺各剂量组睾丸曲细精管排列紊乱、松散，各级生精细胞明显减少。
　　6.凋亡：三聚氰胺各实验组细胞凋亡率呈上升趋势，其中高剂量组与阴性对照组相比，差异有统计学意义（P＜0.01）。
　　7.三聚氰胺各剂量组Bcl-2表达呈下降趋势，与阴性对照组比，差异均有统计学意义（P＜0.01）；Bax、Caspase-3表达均呈上升趋势，中、高剂量组与阴性对照组相比差异有统计学意义（P＜0.01）。
　　结论：
　　1．三聚氰胺对雄性昆明鼠有一定的生殖毒性作用
　　2．其毒性作用主要表现为：睾丸、附睾脏器系数下降；精液质量下降；睾丸能量代谢酶活性降低；睾丸抗氧化能力下降；睾丸组织病理学发生明显改变；睾丸生精细胞凋亡率增加，凋亡相关蛋白表达异常。
　　3．作用机制：三聚氰胺可能干扰小鼠睾丸的氧化-抗氧化系统的平衡；睾丸组织结构发生改变及能量代谢酶活性降低可能引起了小鼠精液质量的改变；凋亡相关蛋白异常表达可能导致睾丸生精细胞凋亡率增加。

目录

中文摘要

前言

材料与方法

1.实验材料

2.实验方法

实验结果

1. 小鼠的一般行为观察

2．小鼠睾丸及附睾脏器系数

3. 精液质量分析

4. 小鼠睾丸匀浆乳酸脱氢酶（LDH）、山梨醇脱氢酶(SDH)

5. 小鼠睾丸超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）

5. 小鼠睾酮（T）

7. 小鼠睾丸组织病理学

8.小鼠凋亡相关蛋白Bcl-2 Bax Caspase-3的表达

讨论

1. 动物模型

2. 三聚氰胺对小鼠睾丸、附睾脏器系数及组织变化的影响

3. 三聚氰胺对小鼠精液质量的影响

4. 三聚氰胺对小鼠睾丸能量代谢酶的影响

5. 三聚氰胺对小鼠氧化应激的影响

6. 三聚氰胺对小鼠血清中睾酮（T）的影响

7．三聚氰胺对小鼠睾丸生精细胞凋亡的影响

结论

1.三聚氰胺对雄性昆明鼠有一定的生殖毒性作用

2.其毒性作用主要表现为

3.作用机制

参考文献

英文摘要

致谢

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