贵州省白血病和淋巴瘤患者弓形虫感染状况调查及其基因型分析

摘要

目的:对贵州省血液系统肿瘤患者的弓形虫感染状况进行血清学和分子流行病学调查，并用多重巢式-聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(Mn-PCR-RFLP)方法进行弓形虫基因分型，探讨血液系统肿瘤患者弓形虫感染状况以及贵州省弓形虫感染的分子流行病学特点。
　　方法:1.采集150例白血病、150例淋巴瘤患者（疾病组）和110份健康人（对照组）外周抗凝血标本。2.采用 ELISA方法检测疾病组及健康对照组外周血血浆中人体内弓形虫特异性抗体（IgG、IgM）以及循环抗原（CAg）。3.采用PCR技术扩增疾病组和健康对照组所有外周血弓形虫高重复DNA片段-529 bp，以检测弓形虫核酸。4.弓形虫高重复DNA片段（529 bp）阳性的标本采用Mn-PCR-RFLP法分析弓形虫c22-8，c29-2，L358，PK1，SAG2(5`-SAG2，3`-SAG2，alt.SAG2)，BTUB，GRA6，SAG3，Apico，SAG1共10个不同遗传标记位点，以鉴定弓形虫的基因型，分析流行于贵州省弓形虫的基因型。另设110例正常健康人群对照，检测上述指标。分析贵州省血液系统患者弓形虫感染的分子流行病学特点。
　　结果:1.健康人、白血病、淋巴瘤组弓形虫抗体阳性率分别为：8.18％（9/110）、18.67%（28/150）、21.33%（32/150）。3组人群中IgG阳性率依次为6.36%（7/110）、16.00%（24/150）和20.00%（30/150），IgM阳性率依次为0.91%（1/110）、2.67%（4/150）和1.33%（2/150），CAg阳性率依次为0.91%（1/110）、2.00%（3/150）和0.67%（1/150）。2.本次调查血液系统肿瘤患者及正常人中均未检测到弓形虫核酸即529 bp基因片段，未能进行弓形虫基因型鉴定。3. Mn-PCR-RFLP鉴定4份贵州株标本结果显示弓形虫的基因型一致,都属于非典型虫株 ToxoDB＃9即Chinese1。
　　结论：1.血液系统肿瘤白血病和淋巴瘤患者弓形虫感染率明显高于正常人群，提示血液肿瘤患者合并弓形虫感染较为常见，临床治疗时应加强对弓形虫感染的防治。2.贵州动物源性弓形虫虫株的基因型的鉴定再次明确了弓形虫Chinese1型在贵州动物体内的感染流行。

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3 讨 论

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综述:刚地弓形虫基因型的鉴定方法研究进展

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