己酮可可碱对小鼠精子体外获能、顶体反应的影响

摘要

本文研究了己酮可可碱(Pentoxifylline，PF)对昆白小鼠精子获能和项体反应(Acrosome Reaction，AR)的作用。 实验一：分别以0mg/ml、0.125mg/ml、0.25mg/ml、0.5mg/ml、1mg/ml、2mg/ml、4mg/ml的PF和10ug/ml的孕酮(Progesterone，P4)作用精子30分钟，然后用考马斯亮蓝(Coomassje brillant blue，CBB)染色法检测各组精子的AR率并进行统计分析。研究上述浓度的PF和P4诱导精子发生顶体反应的作用，分析PF与精子顶体反应的量效关系。结果表明所有的PF处理组和P4处理组，与对照组(PF0.0-30)的AR率都没有显著差异(P>0.05)。 实验二：用上述浓度梯度的PF作用精子30分钟，再用10μg/ml P4处理精子10分钟以诱导获能精子发生顶体反应。对各组的AR率进行统计分析，研究不同浓度的PF对P4诱导小鼠精子发生顶体反应的作用，分析PF与小鼠精子获能的量效关系。结果显示0.125mg/ml PF处理组的AR率与对照组(PF0.0-30：P4-10)的AR率没有显著差异(P>0.05)，而0.25mg/ml PF处理组的AR率与对照组有显著差异(P<0.05)，lmg/ml及以上浓度的PF处理组的AR率与对照组有极显著差异(P<0.01)。 实验三：先使小鼠精子获能培养60分钟，再以同上浓度梯度的PF、10 μ g/ml的P4、PF和P4同时作用小鼠精子10分钟。统计分析各组的AR率，研究不同浓度的PF对获能精子发生顶体反应的作用，分析PF与已获能精子发生顶体反应的量效关系，分析PF与P4对已获能精子发生顶体反应是否有协同作用。结果显示0.5mg/ml及以下浓度的PF处理组的AR率与对照组(PF0.0-10)的AR率没有显著差异(P>0.05)，lmg/ml及以上浓度的PF处理组的AR率与对照组有显著差异(P<0.05)，P4处理组及PF和P4同时处理组的AR率与对照组有极显著差异(P<0.01)，P4处理组与PF和P4同时处理组的AR率没有显著差异(P>0.05)。 实验四：用能促进获能精子发生顶体反应的最低浓度的PF作用精子，分别检测作用0分钟、20分钟、40分钟、60分钟、80分钟、100分钟时精予的AR率并进行统计分析，分析PF与小鼠精子AR的时效关系。结果发现PF处理组和对照组(M16)在0分钟、20分钟、40分钟时的AR率并没有显著差别(P>0.05)，而在60分钟以后PF处理组的AR率明显高于对照组(P<0.05)。

目录

论文说明：英文缩略词表

前 言

材料与方法

一、仪器设备

二、主要试剂配置

三、小鼠精子采集与活精子分离

四、精子的考马斯亮蓝染色及观察

五、 实验一、己酮可可碱与小鼠精子顶体反应的浓度—效应关系

六、 实验二、己酮可可碱对小鼠精子获能的浓度—效应关系

七、实验三、己酮可可碱对小鼠获能精子发生顶体反应作用的研究

七、 实验四、己酮可可碱与小鼠精子顶体反应的时效关系的研究

实验结果

讨 论

结论

参考文献

综述：已酮可可碱对精子功能的作用

致 谢